pBPB共价修饰蝮蛇酸性磷脂酶A2的晶体学数据.pdf

pBPB共价修饰蝮蛇酸性磷脂酶A2的晶体学数据
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BPB抑制剂 晶体生长 蝮蛇 酸性磷脂酶A2 抑制剂物理化学学报赵海燕 杜晓燕 [1]中国科学院生物物理研究所
[2]中国科学院上海生物化学研究 �。的结构，在生化上用 ����修饰分子中的 �����后．酶活力丧�
失，但仍保留对胶原引起聚集的抑制作用 ��，这说明酸性磷脂酶 �。分子上同时存在分立的酶的�
催化活性部位和抑制血小板聚集作用的部位．从获得的酸性磷脂酶 �。的结构 中发现了分子表面�
有一个芳香环密集区域，，被假定为抑制血小板�
聚集活性的部位 ��】�从 ����修饰的磷脂酶 �。的晶体结构分析中还可以看到修饰的酸性磷脂酶�
��的抑制血小板聚集活性的部位是否发生变化，从而进一步说明酶的催化活性与抑制血小板聚�
集作 用部位 关系．�
� 方法及结果�
��� 分 离纯化�
修饰 酶 的制备 方法 ：称取 ���酸性磷脂酶 ��溶于 ���含 �．�����·�� ���� ��������������
�������������������������������������，������·��。，����．�的 ����������������������������������
��������缓�巾液中，边混匀边加入 ������．�������������的 ������������������������溶液，�
�������— ��收到韧蔷， ����— �����收到馘 瞢．联系人 �赵海燕．� 爵采 自然科学基全费助项 目�
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����溶液被分散成细小颗粒，呈雾状悬浮在溶液中．� ��℃保温 �����后除去 ����沉淀， ��
℃透析 ���取上清藏冷冻干燥．得蓟 ����修饰的酸性礴脂酶 ��，该酶达到 电泳纯 �】．�
�．� 昌体生长�
原来我们曾设想修饰酶的结晶条件与天然酶相似．但用天然酶的晶体生长条件