小鼠乳铁蛋白基因克隆和大肠杆菌表达.pdf

农业生物技术学报 JournalofAgriculturalBiotechnology2005,13(1):52~55
多种细菌、真菌有抑制作用 (Arnold .,1977; 进行其它动物乳铁蛋白的基因克隆和表达提供技术
Soukka .,1992)，而且乳铁蛋白在动物消化道中 手段。
经酸性胃蛋白酶降解后，降解产物的抗微生物活性
1 材料和方法
会大大增加。由于乳铁蛋白是一种广谱天然抗生素，
而且其作用后细菌不易产物抗药性，所以引起了研 材料
究者的广泛关注。但是目前乳铁蛋白的研究重点集 动物材料 昆明种(ICR)小白鼠乳腺组织(购
中在人和牛乳铁蛋白的生物学研究，而对于鼠乳铁 于浙江省中医学院实验动物中心)。
蛋白(murinelactoferrin,LFM)研究的相对较少。小鼠 工具酶和化学试剂 Trizol、QIAquick 试剂
乳铁蛋白由 707 个氨基酸残基组成，与牛和猪乳铁 盒、DNA 内切酶和 DNA 连接酶购自 GIBCO 公司，
* 基金项目：国家自然科学基金()资助。
黄海青: 男，1976 年生，硕士研究生。
** 通讯作者。 Authorforcorrespondence. E-mail:<******@>.
收稿日期：2004-02-07 接受日期：2004-04-26
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反转录酶、dNTP、 DNA 聚合酶及缓冲液、质粒 %琼脂糖凝胶电泳检查扩增结果。
DNA 小量抽提 Winzardkit 均购自 Promega 公司， PCR 产物的克隆和测序 PCR 产物进行
pGEM-3Z 克隆载体、pET-28a 表达载体、大肠杆菌 %琼脂糖凝胶电泳，用 QIAquick 试剂盒纯化
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