GENMED SCIENTIFICS INC. GMS12196
缓冲溶液,充分混匀
20.(选择步骤)放进微型台式离心机离心 30 秒,速度为 16000g(或 13000RPM,例如 eppendorf 5415)
21.(选择步骤)小心抽去上清液
22.(选择步骤)加入 1 毫升用户自备的 HANK 平衡盐缓冲溶液或 PBS 缓冲溶液,充分混匀
23.检测方法
A) 荧光显微镜定性分析
1) 移出 10 微升离心管中的混匀物到载玻片上
2) 放上盖玻片或封片
3) 在荧光显微镜下观察荧光细胞:激发波长 543nm,散发波长 598nm――显示强烈桔红色荧光
细胞的为脂类丰富的阳性细胞
B) 荧光分光光度计定量分析
1) 移取 1 毫升细胞悬液到 1 毫升比色杯
2) 放进荧光分光光度计测读:激发波长 543nm,散发波长 598nm――确定活体细胞脂类产量
方法二:直接法
实验开始前,将试剂盒里的 GENMED 染色液(Reagent A)冻融,然后移出 2 毫升用户自备的 HANK 平衡盐缓
冲溶液或 PBS 缓冲溶液到 毫升离心管,加入 微升 GENMED 染色液(Reagent A),混匀后,置入冰槽
里,标记为 GENMED 染色工作液。然后进行下列操作。
21. 开启荧光显微镜
2. 小心抽掉 25cm2细胞培养瓶里的培养液
3. 加入 3 毫升用户自备的 HANK 平衡盐缓冲溶液或 PBS 缓冲溶液到每个细胞培养瓶,覆盖培养瓶表面
4. 小心抽掉清洗液
5. 加入 2 毫升 GENMED 染色工作液
6. 在 37℃培养箱孵育 10 分钟,避免光照
7. 在荧光显微镜下观察荧光细胞:激发波长 543nm,散发波长 598nm――显示强烈桔红色荧光细胞的为
脂类丰富的阳性细胞
注意事项
1. 本产品为 500 次操作
2. 操作时须戴手
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