人免疫球蛋白GIgG酶联免疫分析.docx

人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
96T
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:
-80闻/ml使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)含量。
实验原理
人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
96T
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:
-80闻/ml使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白G(IgG)水平。用纯化的抗-IgG抗
体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G(IgG),再与
HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物
TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G(IgG)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度
(OD值)，通过标准曲线计算中¥品中人免疫球蛋白G(IgG)浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20mlX1瓶
7
终止液
6mlx1瓶
2I
酶标试剂
6mlx1瓶
8
标准品(160闻/ml)

3
酶标包被板
12孔X8条
9
标准品稀释液

41
样品稀释液
6mlx1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6mlx1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6mlx1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20C保存，但应避免反复冻融
.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤
：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
80闻/ml
5号标准品
150d
的原倍标准品加入150口标准品稀释液
40闻/ml
4号标准品
150d
的5号标准品加入150口标准品稀释液
20闻/ml
3号标准品
150d
的4号标准品加入150口标准品稀释液
10闻/ml
2号标准品
150d
的3号标准品加入150口标准品稀释液
5闻/ml
1号标准品
150d
的2号标准品加入150口标准品稀释液
.加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准
孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50口，待测样品孔中先加样品稀释
液40人然后再加待测样品10M(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
.温育：用封板膜封板后置37c温育30分钟。
.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸储水20倍稀释后备用
.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
.加酶：每孔加入酶标试剂504，空白孔除外。
.温育：操作同3。
.洗涤：操作同5。
.显色：每孔先加入显色剂A50U,再加入显色剂B50M,轻轻震荡