RNA加尾和引物延伸法检测黑腹果蝇3种microRNA表达量.pdf

第 32卷第 1期
华南农业大学学报
V 32, N o. 1
2011年 1月 Journa l o f South China A gricultural U niversity Jan. 2011
RNA 加尾和引物延伸法检测黑腹果蝇
3种 m icroRNA 表达量
戚晓娴, 李晓梅, 陈
永, 钟国华
( 华南农业大学昆虫毒理研究室, 广东广州 510642)
摘要: 采用 RNA 加尾和引物延伸 rea l tim e PCR 法实时定量检测了黑腹果蝇 D rosoph ila m elanogaster的 bantam、m ir
14、m ir
2a共 3种 m icroRNA ( m iRNA ) 在各发育阶段组织中的相对表达情况, 发现 3种 m iRNA 在不同发育时期的表
达差异明显, 其表达变化规律与文献报道基本一致, 验证了该法的可靠性. 这种加尾和引物延伸!方法, 仅需 1~
10 ng 总 RNA 或等同物, 检测范围可达 7个数量级, 为昆虫 m iRNA 研究提供了可靠的定量检测方法.
关键词: 黑腹果蝇; m ic roRNA; RNA 加尾; 引物延伸; 定量检测
中图分类号: S482. 39
文献标识码: A
文章编号: 1001
411X ( 2011) 01
0024
06
R eal
T im e Quantification of 3 m icroRNA s ofD rosophila m elanogaster by
RNA
Tailing and Prim er
Extension qRT
PCR
Q I X iao
x ian, LI X iao
m e,i CH EN Yong, ZHONG Guo
hua
( L aboratory of Insect T ox ico logy, South China A gricultural U niversity, G uang zhou 510642, Ch ina)
Abstract: The m od ified RNA
ta iling and prim er
extension qRT
PCR m ethod w as used to detect relative
quantity of 3 m icroRNA s, bantam, m ir
14 andm ir
2a, in various developm ental stages in Dro sophila m ela
nogaster. The resu lts show ed that the expression patterns o f these m iRNAs had the sign ificant d ifferences
in d ifferent developm ental stages, and the change dynam ics o fm iRNAs re lative quantities w ere consistent
w ith the literatures w hich verified