玛咖多糖含量的测定.doc

玛咖多糖含量的测定
陈燕青，陈思浩，丁德润
(上海工程技术大学化学化工学院, 上海 201600)
摘要：用水提醇沉法从玛咖块根粉末中提取了玛咖多糖, Sevage法脱蛋白。玛咖多糖含量用硫酸- 苯
酚法测定, 测定波长为490 实验方法
为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线,
归处理。
并进行回
玛咖多糖的提取[2]
称取9g玛咖块根粉末,

按 1∶10(w/v)的比例加蒸馏
换算因子的测定
精 确 称 取 干 燥 恒 质 量 的 玛 咖 多 糖 ,

水,
控制温度在90℃搅拌回流2h。将上层清液倒出,
置 于
下层混浊液中继续加入蒸馏水, 重复以上操作,
集上清液。
收
50mL容量瓶中, 加蒸馏水稀释至刻度, 摇匀。精密
, 法测定吸光度, 并计算换算因素。
将收集的上清液集中于烧杯中, 浓缩至原来 体
积 的1/5。 将 浓 缩 液 冷 却 ,
加 入 淀 粉 酶 ,
调pH 值 至
玛咖干粉中多糖含量的测定
玛 咖 干 粉 水 溶 液 的 配 制 精 确 称 取 玛 咖 粉 末


, 放置45℃水浴中酶解2h, 迅速升温至100℃灭酶
后继续保温提取2h, 重复3次, 离心分离去沉淀, 清 液中加入4 倍体积的95% 乙醇溶液, 冰箱中静置10～
, 加入95%乙醇溶液, 80℃回流提取1h,
趁热
过滤, 沉淀用95% 乙 醇溶液洗涤3 次后, 挥干溶剂。
沉淀连同滤纸置于烧杯中, 加蒸馏水沸水浴静置1h, 趁热过滤, 沉淀用热水洗涤3次, 合并溶液于50mL容 量瓶中, 用蒸馏水定容至刻度线, 摇匀备用。
12h, 过滤得到棕黄色的沉淀,
Sevage[5]法除蛋白,
重
复处理6～8次得到棕黄色玛咖多糖粉末, 用95%的乙
醇溶液反复洗涤2～3次置于真空干燥,
苯酚溶液的配制
备用。
多糖含量测定 精确吸取配制好的玛咖干粉溶

称取苯酚100g, ,
常
,
光度, 计算多糖含量。
压 蒸 馏 , 收 集 182℃馏 分 , 精 密 称 取 该 馏 ,
置于250mL棕色容量瓶中,
加蒸馏水溶解并稀释至刻
稳定性实验
取玛咖干粉溶液适量, 、
30min、 60min、 90min、 120min、 150min、 180min 测 定吸光度。

度(6%苯酚溶液), 摇匀, 放入冰箱中备用。
葡萄糖标准溶液的配制
精 密 称 取 105℃烘 干 至 恒 质 量 的 葡 萄 糖 250mg,

加蒸馏水溶解,
定容至250mL,
得到浓度为1mg/mL的
精密度实验
取上述样品进行6次测定,
该方法的重现性。

葡萄糖标准溶液。
计算相对偏差,
考察
最大吸收波长的选择
精 密 量 取 1mg/mL 葡 萄 糖 标