生化论文中供参考.doc

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萌发种子淀粉酶酶学性质的研究
学院：生命科学学院
班级：生科1301
姓名：张曜宇
学号：A09130099
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萌发种子淀粉酶酶学性管号
I－1
I－2
I-3
淀粉酶原液ml
1
1
1
钝化β－淀粉酶
置于70℃水浴15分钟，冷却
酶稀释液ml
0
0
0

1
1
1

4
0
0
预保温
试管与淀粉液置于40℃水浴10分钟
1℅淀粉溶液ml
2
2
2
保温
在40℃恒温水浴中准确保温5分钟

0
4
4
取反应后溶液2mL于25ml试管中，再各加入3，5-，摇匀，至沸水中准确煮5min，取出冷却至室温。用蒸馏水稀释至25 ml，摇匀。用分光光度计在520nm的波长下进行比色，记录吸光值。
总酶活性的测定
，用蒸馏水稀释，取25mL具塞刻度试管3只，按下表处理。
项目
总淀粉酶活性的测定
试管号
I－4
I－5
I-6
淀粉酶稀释液ml
1
1
1

1
1
1

4
0
0
1℅淀粉溶液ml
2
2
2
保温
在40℃恒温水浴中准确保温5分钟

0
4
4
温度对酶活性影响
试管号
A
a
B
b
C
c
D
d

1
　
1
　
1
　
1
　
1℅淀粉溶液ml

　

　

　

　
淀粉酶提取液
　
1
　
1
　
1
　
1
保温
4℃
室温
40℃
沸水浴
混合
将ABCD分别倒入abcd中
酶促反应
4℃
室温
40℃
沸水浴
碘液
10分钟后，取出冷却，向每个试管中加入1－2滴碘液
取反应后溶液2mL于25ml试管中，再各加入3，5-，摇匀，至沸水中准确煮5min，取出冷却至室温。用蒸馏水稀释至25 ml，摇匀。用分光光度计在520nm的波长下进行比色，记录吸光值。
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温度对酶活性的影响
取8只试管按下表处理。
pH值对酶活性的影响
配制pH＝
pH对酶活性的影响
管号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Buffer（ml）
（pH=）
（pH=）
（pH=）
淀粉溶液ml



酶提取液ml
1
1
1
酶促反应
混匀40℃中保温10分钟
碘液
1滴
激活剂与抑制剂对酶活性的影响
取5只试管按下表处理
激活剂与抑制剂对酶活性的影响
管号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
pH＝（ml）
2
2
2
Nacl溶液ml
1
　
　
CuSO4溶液ml
　
1