触酶试验氧化酶试验(共2页).doc

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触酶试验
(1)原理：
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触酶试验
(1)原理：
　　触酶又称，具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢成为水和原子态氧，继而形成氧分子，出现气泡。
(2)方法：
　　取洁净玻片1张，用接种环挑取细菌，加3％H2O2 1滴，立即观察结果。
(3)结果：
　　若立即出现大量气泡为阳性。无气泡为阴性。
(4)应用：
　　大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶，但链球菌科阴性，故常用此试验来鉴定。此外，金氏杆菌属的细菌也为阴性。分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验，结核分枝杆菌为阴性，戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。
注意事项：
①3％H2O2溶液要新鲜配制。　　②不宜用血琼脂平板上生长的菌落，因红细胞含有触酶，可致假阳性反应。　　③取对数生长期的细菌。
氧化酶试验
（1）原理：氧化酶（细胞色素氧化酶）是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。
（2）试剂：1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。
（3）方法：常用方法有三种；
1）菌落法：直接滴加试剂于被检菌菌落上。
2）滤纸法：取洁净滤纸一小块，沾取菌少许，然后加试剂。
3）试剂纸片法：将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片，取菌涂于试剂纸上。
（4）结果：细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色，为阳性。为保证结果的准确性，分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性对照。
（5）应用：主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。
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耐酸性染色法(萎－倪二氏法)
石炭酸品红染色液碱性品红
95%乙醇 10mL5%酚水溶液 90mL将品红溶解于乙醇中，然后与酚溶液混合。
3%盐酸－乙醇 浓盐酸 3mL 95%乙醇 97mL
复染液吕氏碱性美蓝染色液。；95%乙醇 30mL