用正交法测定几种因素对酶活力的影响实验报告.docx

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用正交法测定几种因素对酶活力的影响一、前言
正交实验法
正交实验法就是利用排列整齐的表-正交表来对试验进行整体设计、综合比较、统计分析，实现通过少数的实验次数找到较好的生产条件，以达到最高生产工艺效果。正交表能够在因素变化范围内均-1/1-2/…13213-3各出现一次
'\\列号试验号\\
1
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3
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9
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2
1

'、试验号\试剂/ml、
1
6
8
2
4
9
3
5
7
2%血红蛋白
液









缓冲溶液
pH7

pH8

pH9

pH8

pH9

pH7

pH9

pH7

pH8

37C预温5min
50C预温5min
60C预温5min
酶液









37C反应10min
50C反应10min
60C反应10min
（1）各试管编号，分别加入对应容量的底物（2%Hb）和相应pH
值的缓冲液，混匀；（2）同温处理的3支试管同时预温5min;
（3）各试管依序分别加入对应容量的trypsin酶液（统一加样时间间隔），混匀；（4）同温处理的3支试管置对应恒温水浴中反应10min;（5）各试管依次加入15%三氯醋酸液2ml，混匀以终止反应；（6）非酶促对照：另取一试管，先加入2%，再加15%，;(7)上述各管反应液室温静置15min后过滤，取滤液待测酶活；
(8)酶活测定(考马斯亮蓝法，标准曲线制备略)：取试管若干支编号，,混匀，室温静置3min,以非酶促对照管为空白，于波长595nm比色测定。
数据记录及分析将各管测定所得光密度值对应填入表格，分别算出各因素一、二
及三水平的试验结果总和I、H和皿，并分别取其平均值计算相应的极差(各列中最大与最小值之差)；比较各因素极差的大小以评估各因素对酶活的影响，并对酶活最高时的各因素水平作一直观分析。
1. 六、实验结果及数据处理实验数据：
温度
pH
\
pH7
pH8
pH9
测量
值
平均值
测量
值
平均值
测量
值
平均值



37









50