生化实验基本操作要求详解.ppt

生物化学实验基本操作一. 生物化学实验基本操作——玻璃仪器的洗涤?洗涤干净的标准:在生化实验中,玻璃仪器洁净与否,是获得准确结果的重要环节。洁净的玻璃仪器内壁应十分明亮光洁,无水珠附着在玻壁上。㈠常用的洗涤方法: (如烧杯、试管等): 可用毛刷蘸肥皂液、合成洗涤剂仔细刷洗。然后用自来水反复冲洗,最后用少量蒸馏水冲洗 2~3 次,倒置在器皿架上晾干或置于烘箱烤干备用。 (如吸量管、容量瓶、滴定管等) : 不能用毛刷刷洗。用后应及时用自来水多次冲洗,细心检查洁净程度,根据挂不挂水珠采取不同处理方法。(1)如不挂水珠,用蒸馏水冲洗、干燥,方法同上; (2)如挂水珠,则应沥干后用重铬酸钾洗液浸泡 4~6 小时, 然后按上法顺序操作,即先用自来水冲洗,再用蒸馏水冲洗, 最后干燥。 ,有三种洗涤方法: (1)先用 45% 尿素溶液浸泡,使血浆蛋白溶解,然后用自来水冲洗; (2)也可用 1% 氨水浸泡,使血浆溶解,然后再依次用 1% 稀盐酸溶液、自来水冲洗; (3)以上二法如达不到清洁要求,可浸泡于重铬酸钾洗液 4~6 小时,再用大量自来水冲洗,最后用蒸馏水冲洗 2~3 次。 : 应先置于 1~2% 稀盐酸溶液中浸泡 2~6 小时,除去附着的游离碱,再用自来水冲洗干净,最后用蒸馏水冲洗 2~3 次。?凡用过的玻璃仪器,均应立即洗涤,久置干涸后洗涤十分困难。如不能及时洗涤,先用流水初步冲洗后浸泡在清水中,待后按常规处理。二. 生物化学实验基本操作——吸量管的使用吸量管和定量吸(移)液器(微量加样器)均为用来转移一定体积溶液的量器。㈠吸量管: 生化实验中常用的有三种,最常用的是刻度吸量管。 : ⑴刻度吸量管的种类: ?①按容量规格来分,有 、 、 、 、1、2、5、 10ml 等数种。其精密度按不同的容积可达移取量的 ~1% 。通常将管身标明的总容量分刻为 100 等分。因此, 10ml 的吸量管一格代表 ; 1ml 的吸量管一格代表 , 其余类推。?②按“零”点位置来分,有“0”点在吸量管上端的(即读数从上而下逐渐增大),也有“0”点在吸量管下端的(读数从下而上逐渐增大)。两种标示方法,在使用时各有方便之处。?③按刻度方法来分,刻度吸量管也有两种,一种是刻度刻到尖端的,将液体放出时,应吹出残留在吸量管尖端的少量液体,另一种是刻度不刻到尖端的。?⑵刻度吸量管的正确使用方法: 用右手拇指和中指夹住管身,将吸量管的尖端伸入试液深处, 左手持洗耳球把试液吸入管内至高过刻度以上时,迅速用右手食指按住吸量管的上口,以控制试液的泄放。吸液后应尽量使吸量管保持垂直,使右眼与刻度等高,稍微轻抬食指或轻轻转动吸量管,使试液面缓慢降落,至管内试液弯月面的最低点与吸量管的刻度线相齐为止。?然后将吸量管插到需加试剂的容器中,让尖端与容器内壁靠紧,松开食指让液体流出。液体流完后再等 15秒钟,捻动一下吸量管后移去(如需吹的吸量管,则吹出尖端的液体后再捻转一下吸量管移去)。⑶使用刻度吸量管的注意事项: ?①选择适当规格的吸量管:吸量管的最大容积应等于或略大于所需容积( ml数)。?②仔细看清吸量管的刻度情况:刻度是否包括吸量管尖端的液体?读数方向是从上而下,还是从下而上? ?③拿吸量管时,刻度一定要面向自己,以便读数。?④吸取试剂时应注意三点:一是先吹去吸量管内可能存在的残留液体,二是将吸量管插入试剂液面深部(以免吸液过程中因液面降低而吸入空气产生气泡或管内试剂进入洗耳球),三是使用洗耳球(不可直接用口吸)。