茜素红染色.docx

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，95%乙醇固定10min，%茜素至100mL。
3. 。
4. 密封瓶口于室温保存。
注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
7、Tris-HCl平衡苯酚
□配置方法
使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160C对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。
操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。
苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，，苯酚平衡操作方法如下：
液化苯酚应贮存于-20C,此时的苯酚呈现结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68C水浴中使苯酚充分溶解。
加入羟基喹啉(8-Quinolinol)%。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色。有助于方便识别有机相。
① 加入等体积的1MTris-HCl()，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。
② 重复操作步骤③。
③ -HCl()，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。
④ 重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。
⑤ 。
⑥ 将苯酚置于棕色玻璃瓶中4C避光保存。
13、20%(W/V)Glucose
□组份浓度20%(W/V)Glucose
也己制量100mL
□~200mL烧杯中，加入约80mL的去离子水后，搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100mL。
3. 咼温咼压灭菌后，4"C保存。
14、SolutionI(质粒提取用)
□组份浓度25mMTris-HCI(),10mMEDTA,50mMGlucose
也己制量1L
，置于1L烧杯中。
1MTris-HCl()25mL

()
20mL
20%Glucose
()
45mL
dH2O
910mL
2. 咼温咼压灭菌后，4C保存。
3. 使用前每50mL的SoliutionI中加入2mL的RNaseA(20mg/mL)
15、SolutionII(质粒提取用)
□组份浓度250mMNaOH,1%(W/V)SDS
也己制量500mL
。
2.