氯离子的检测方法.ppt

氯离子的检测方法
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紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visible spectrophotometry, UV-VIS)
按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称

用紫外吸收光谱确定试样的纯度是比较方便的。
如蛋白质与核酸的纯度分析中，可用A280/A260的比值，鉴定其纯度。
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紫外-可见吸收光谱一般不用于化合物的结构分析，但利用紫外吸收光谱鉴定化合物中的共轭结构和芳环结构还是有一定价值。
例如，某化合物在近紫外区内无吸收，说明该物质无共轭结构和芳香结构。
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§2. 朗伯-比尔定律
设入射光强度为I0，吸收光强度为Ia,透射光强度为 It，反射光强度为Ir，则
I0= Ia+ It+ Ir
由于反射光强度基本相同，其影响可相互抵消，上式可简化为：

I0= Ia+ It
一、吸光度和透光度
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吸光度: 为透光度倒数的对数，用A表示，
即
A=lg1/T=lgI0/It
透光度：透光度为透过光的强度It与入射光强度I0之比，用T表示：
即 T= It/I0
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二、朗伯-比尔定律
朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即
A= κ cl
式中比例常数κ与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。
朗伯-比尔定律是紫外-可见分光光度法的理论基础。
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三、吸光系数
当l以cm，c以g/L为单位，κ称为吸光系数，用 a表示。
A= a cl
a的单位为L/()
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当l以cm，c以mol/L为单位，κ称为摩尔吸光系数，用 ε表示。
ε的单位为L/，它表示物质的浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时，溶液的吸光度。
摩尔吸光系数
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比吸光系数
比吸光系数是指百分含量为1%， l为1cm时的吸光度值，用 表示。
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四、偏离朗伯-比耳定律的因素
（1）入射光为非单色光
（3）光程的不一致性。
光源不是点光源，比色皿光径长度不一致，光学元件的缺陷引起的多次反射等，均造成光径不一致，从而与定律偏离。
（2）溶液的不均性。
实际样品的混浊，加入的保护胶体，蒸馏水中的微生物，存在散射以及共振发射等，均可吸光质点的吸光特性变化大。
本讲稿第二