凝胶色谱数据处理操作步骤.doc

Agilent GPC软件
GPC系统的校正与样品分析:
1、从桌面打开离线工作站(offline),进入到"Data Analysis"画面。
2、从 C:\chem32\1\DATA\STANDARED-0805子目录调入数据文件0805-1(或点击打开),点击,选中Manual Events旁边的空白框(勾叉),然后在下面的Events Table中,用图标逐一删除最下面的4行。点击图标,回到以前的窗口。点击取消全部原有积分,再用重新对目标峰进行积分(3个,注意起点及终点的位置选取)。
3、积分结束后,点击菜单栏Integration的Copy manual Events to Methord,存入方法。
4、点击GPC菜单栏的De-Activate GPC进行去激活操作,再重新点Activate选项进行激活,得到下图状态:再点击OK按钮。
5、从 GPC 菜单选择“Calculate GPC-Results”,GPC-Addon 软件将打开并已经设置好基线,缺省的 校正曲线用于产生分子量数据。但是,这些分子量肯定不对,因为缺省的数据还没有与实际数据相关联。
建立校正表
现在我们可以根据峰保留体积和已知的摩尔质量建立校正表:
1. 将Calibration窗口放大,单击 Window |Calibration 并在GPC-Addon软件菜单栏使用File| New 产生新的校正文件。
2. 从菜单栏中的windows选项中激活 elugram
在最左侧第一个峰x-轴下方右键单击并选择find maximum
表1 标准样品分子量分布信息
TABLE 1

分子量分布信息
Sample
PS ReadyCal grn
PS ReadyCal red
PS ReadyCal wht
Data file
0805-1
0805-2
0805-3
Peak 1
170800
578500
12830
Peak 2
31420
70950
2340
Peak 3
1480
5120
162
3. 照上面表1按列输入每一峰对应的摩尔质量并选择添加到校正表“Add to calibration”见下图:此步骤要操作三次,对应三个峰值。
4. 切换回离线工作站并调入下一个校正文件 0805-2,对谱图进行同上处理,再从GPC菜单选择计算GPC结果“Calculate GPC-Results”。
5. 我们继续在X轴下面左数第一个峰的位置下单击右键并选择find maximum ,在GPC Addon elugram window按表1数据输入相应摩尔质量并选择添加到校正表“Add to calibration”(切记不要在calibration窗口中再新建文件)。
6. 使用数据文件0805-3,同上处理。
7. 当所有9个校正标准都已经添加到校正表后,激活Calibration窗口,在Fit中使用“PSS Poly 5" 来拟合数据。(pare下拉菜单的Deviation来观察,理想的曲线拟和应该是偏差点随机分布在标准曲线的两侧。)
8. 点菜单栏中Calibration| Settings, 输入Mark Houwink