清热解毒口服液质量标准研究.doc

清热解毒口服液质量标准研究
摘要 目的:建立清热解毒口服液的质量控制方法。方法:选取薄层色谱法,鉴别连翘、黄柏、栀子、赤芍等主要药效成分;采用高效液相色谱法测定方中君药金银花的主要药效成分绿原酸的含量。结果:确立了清热解毒口服、栀子、芍药4种分离度较好,斑点清晰,重复性好的成分列入质量标准。此外采用高效液相色谱法测定方中君药金银花的主要药效成分绿原酸的含量。为严格控制清热解毒口服液的质量,提升其质量标准提供了定性定量实验依据。
1 仪器与试药
仪器 岛津LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津公司);超声波清洗器(上海安宁科学仪器公司);BP210S型电子天平(德国SARTORIUS公司)。ZF-C型三用紫外分析仪(上海康禾光电仪器有限公司);202-1型电热恒温干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司);电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司);HDM-1000数显控温电热套(北京中兴伟业仪器有限公司);TG328B分析天平(上海精科天平, mg);XY600-2C电子分析天平(常州市幸运电子设备有限公司);SHZ-D循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司),FW-100D高速万能粉碎机(天津鑫博得仪器有限责任公司)。
试剂 甲醇(色谱纯),乙腈(色谱纯),超纯水。 分析样品 绿原酸对照品(批号:161021-201413,%)、连翘苷对照品(批号:160821-201412,%),栀子苷对照品(批号:160911-201405,%)、芍药苷对照品(批号:160715-201402,%),黄柏对照药材(批号:160625-201502,%)均购自中国药品生物制品检定所;清热解毒口服液(延安市中医医院制剂室,批号为20170226、20170307、20170412,规格:10 mL/瓶)。
2 方法与结果
薄层色谱鉴别
连翘薄层鉴别 量取3批次清热解毒口服液各20 mL,用水饱和的正丁醇萃取2次,每次20 mL,合并正丁醇液,先用氨试液(取浓氨溶液20 mL,加水使成50 mL,即得。)40 mL洗涤,弃去氨试液,再用正丁醇饱和的水40 mL洗涤,分取正丁醇液,蒸干,加1 mL甲醇溶解,作为供试品溶液。称取连翘苷对照品,用甲醇制成1 mg/ mL对照品溶液。取样品中缺连翘的口服液,按制备供试品溶液方法制得阴性样品溶液。吸取供试品溶液、对照品溶液各15 μL、5 μL,点于同一硅胶薄层板上,以氯仿-甲醇(5∶ 1)溶液系统为展开剂,展开,晾干,喷以10%硫酸乙醇液,加热(105 ℃)至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的紫红色斑点。而阴性样品无此斑点[1-4]。见图1。
赤芍薄层鉴别 量取3批次清热解毒口服液各20 mL,用水饱和的正丁醇40 mL分2次提取,合并正丁醇液,蒸干,用乙醇1 mL溶解,作为供试品溶液。称取芍药苷对照品,用乙醇制成2 mg/mL对照品溶液。取样品中缺赤芍的口服液,按制备供试品方法制得阴性样品溶液。吸取供试品、对照品溶液各15 μL、5 μL,点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(∶ 10∶ )溶液系统为展开剂,展开,晾干,且喷以5%香草醛硫酸溶液,加热(105 ℃)至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的蓝紫色斑点。而阴性样品无此斑点[1-4]。见图2。
栀子薄层鉴别 量取3批次清热解毒口服液各20 mL,加乙酸乙酯30 mL,分两次提取,合并乙酸乙酯液,蒸干用乙醇1 mL溶解,作为供试品溶液。称取栀子苷对照品,加乙醇制成2 mg/mL对照品溶液。取样品缺栀子的口服液,按制备供试品溶液方法制得阴性样品溶液。吸取供试品溶液、对照品溶液各15 μL、5 μL,点于同一硅胶薄层板上,以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5∶ 5∶ 1∶ 1)溶液系统为展开剂,展开,取出,晾干,以10%硫酸乙醇液为显色剂,加热(105 ℃)至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同土红色的斑点,而阴性样品无此斑点。见图3。
黄柏薄层鉴别 量取3批次清热解毒口服液各20 mL,蒸至10 mL,用浓氨调pH值至10,用相同体积的氯仿萃取2次,合并氯仿液,蒸干,加甲醇1 mL溶解,作为供试品溶液。 g,加1%醋酸甲醇20 mL,超声波处理20 min,滤过,滤液蒸至2 mL,作为对照药材溶液。取样品中缺黄柏的口服液,按制备供试品溶液方法制得阴性样品溶液。分别吸取供试品溶液、对照药材溶液20