0922粪便核酸提取试剂盒说明书.pdf

磁珠法粪便核酸提取试剂盒（常规版）
Faeces DNA Extraction Kit (Regular Version)
【目 录 号】FDE-5005、FDE-5030
【运输条件】2~25℃μL 100μL
注：1）每次吸取磁珠悬浮液前尽量摇晃均匀；2）为提高效率建议使用排枪。2． 上机样品的获得
：称取 200mg 左右的粪便只 EP 管中，分别加入 1mL 的裂解液、20μL
蛋白酶 K，涡旋振荡 1min（须将管底的粪便振荡起来）后，58℃温浴 30min（每隔 5min
颠倒混匀一次）。
：吸取 200μL 左右的粪便至 EP 管中，分别加入 200μL 裂解液、20μL
蛋白酶 K，涡旋振荡 1min（须将管底的粪便振荡起来）后，58℃温浴 15min（每隔 5min
颠倒混匀一次）。
注：如需去除 RNA，请额外加入 RNase A（100mg/mL）5μL。
1）裂解完毕的样本，室温 12000rpm，离心 5min，转移 400μL 上清至新的 EP 管内。
2）向装有上清的 EP 管内加入 250μL 裂解液，上下颠倒 5 次，混合均匀，12000rpm，
离心 5min，保留上清，待用。
3． 上机提取
1）从第2步裂解完毕的样本中吸取450μ L上清至准备好的96孔板的第2/8列；
2）将96孔版样品板放入ETP-300型核酸提取仪中，并插入磁棒套；
3）打开仪器操作程序，调用“粪便核酸提取”程序，单击“运行”执行提取程序。
“粪便核酸提取”程序参数设置如下，如仪器程序参数与说明书不一致，请以说明书为准：
一组温度 二组温度 三组温度 四组温度
步骤编号 孔位 运行类型 振荡时间(秒) 分离时间(秒) 挥发时间(秒) 振荡幅度 振荡强度
(℃) (℃) (℃) (℃)
1 1 磁珠转移 1 10 0 2 弱 0 0 0 0
2 2 DNA 结合 120 0 0 4 强 0 0 0 0
3 2 DNA 结合 400 15 0 4 弱 0 0 0 0
4 3 清洗 1 250 10 0 5 强 0 0 0 0