甘油的检测方法汇总.docx

甘油的检测方法汇总


甘油的检测方法汇总



将甘油标准系列溶液在最佳色谱条件下进行HPLC分析,以峰面积外标法定量得到甘油标准曲线；
按照样品预处理方法处理后进样5微升,记录峰面积,代入线性方程中,计算其测定值。将计算值乘以稀释倍数后,即得发酵液中甘油的含量。
气相色谱法
：气相色谱分析法是用于分离分析复杂样品中的化合物的一种方法，其原理是一定量的气体或液体分析物被注入到柱一端的进样口中，在载气带动下通过色谱柱，分析物的分子会受到柱壁或柱中填料的吸附。由于不同的样品具有不同的物理和化学性质，与特定的固定相有着不同的相互作用，使得每一种类型的分子都有自己的通过速率，因此，分析物中的各种不同组分就会在不同的时间到达柱的末端，从而得到分离。当化合物从柱的末端流出时，它们被检测器检测到，产生相应的信号，并被转化为电信号输出，从而确定每一个组分到达色谱柱末端的时间顺序以及每一个组分的含量。

（1）标准溶液的配制 在7个25mL容量瓶中分别准确称入0、、、、、、（），再分别移入2mL内标贮备液，用混合溶剂定容并摇匀，作为标准工作溶液。其中甘油质量浓度分别为0、2、4、8、12、20g/L，内标质量浓度均为8g/L。
（2）样品的制备 在25mL容量瓶中加入5ml的发酵液样品，移入2mL内标贮备液，用混合溶剂定容至刻度并摇匀。
（3）GC条件
色谱柱：HP-5石英毛细管柱，30m（柱长）×（内径）×（膜厚）。柱温：初始温度120℃，保留5min，以20℃/min升至290℃，保留10min。进样口温度：280℃，进样量：，分流比：100∶1。检测器（FID）温度：300℃，氢气流速：40mL/min，空气流速：300mL/min。载气：氮气，流速：1mL/min，恒流模式
（4）进样，计算
酶电极法
1、检测原理
利用生物酶只能催化一种或一类底物的性质，将甘油氧化酶进行固定化处理，样本中的甘油在甘油酶膜的作用下被催化生成过氧化氢，根据电化学的原理，过氧化氢的浓度与电压值正相关，根据标准液、缓冲液的电压值响应值来确定样本中甘油浓度。