高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯实验报告.docx

高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯实验报告
高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯
1553607 胡艺蕾
实验时间：2017年4月1日 实验温度：℃
一、实验目的
1、了解高效液相色谱仪的组成及其工作原理和基本操作。
高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯实验报告
高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯
1553607 胡艺蕾
实验时间：2017年4月1日 实验温度：℃
一、实验目的
1、了解高效液相色谱仪的组成及其工作原理和基本操作。
2、对邻苯二甲酸酯进行分离和测定。
3、探究不同流动相及不同流动相比例对流速、柱压、保留时间及分离度的影响。
4、了解液相色谱法定量测定的原理。
二、实验原理
1、实验采用的反相液固吸附色谱法，其分离机理是：当流动相通过吸附剂时，在吸附剂（固体相）表面发生了溶质分子取代吸附剂上的溶剂分子的吸附作用。固体相为非极性分子，如十八烷基键合相，流动相为极性分子。
Agilent1260高效液相色谱仪：
脱气机：真空室内半透膜管路，对流动相进行脱气
四元泵：二元泵各控制一种溶剂
可设置的流速范围：–10 mL/min mL/min步进
UV检测器： 用于检测通过样品后的紫外光
类型：双光束光路设计
光源：氘灯 波长范围：190 – 600 nm
手动进样器：进样20μL
色谱柱：填料:十八烷（适合中性、弱酸碱）
×100mm, µm
2、试剂
流动相：纯水、甲醇、乙腈
样品：DMP、DEP、DBP
四、实验步骤
1、开启电脑，开启脱气机、泵、检测器等的电源，启动软件。
2、预先脱气（直到导管中无气泡），设定波长：220nm。
3、设定流速、流动相比例等参数，选择合适的流动相。
4、进样阀柄置于“LOAD”，进样针用乙醇洗涤2-3次，取样，进样，将进样阀扳至“INJECT”。
5、保存并处理数据。
五、实验结果
1、样品：DMP1:20水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：
样品：DMP1:10水溶液20μL流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：
样品：DMP1:20水溶液10μL 流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：
比较1和2的峰面积和峰高可以发现，在进量一定时，峰面积和峰高与样品的浓度成正比。比较1和3可发现，在样品浓度相同时，峰面积和峰高与样品的进量成正比。因此我们可以得出结论，峰面积和峰高与加入样品的物质的量成正比，这也是液相色谱法进行定量分析的依据。对这三组数据画出标准曲线：
由标准曲线可以看出：
峰面积和峰高与样品的量基本成线性关系，且峰面积的相关性比峰高的相关性要高，更适合用于定量分析。
样品：混合样品1:10水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：30% 甲醇：70% 流速：
计算分离度和塔板数
R12=-/(+)/2= R23=-/(+)/2=
nDMP=16*()^2= nDEP=16*()^2=
nDBP=16*()^2=
样品：混合样品1:10水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：
计算分离度和塔板数
R12= R23=
nDMP= nDEP= nDBP=
样品：混合样品1:10水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：
计算分离度和塔板数
RDMP=-/(+)/2= RDEP=-/(+)/2=
nDMP=16*()^2= nDEP=16*()^2=
nDBP=16*()^2=
7、样品：混合样品1:10水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：10% 乙腈：90% 流速