日本菟丝子对薇甘菊的化感作用.doc

322 生态环境 第17卷第1期（2008年1月）
李秋玲等：日本菟丝子对薇甘菊的化感作用 实验材料
受体植物：长合短叶十三早萝卜种子购买于广州长合种子有限公司；薇甘菊种子采自珠海淇澳岛，于4 ℃保存备用。
供体植物：日本菟丝子新鲜茎于2007年8月采自湛江市遂溪县。
实验方法
日本菟丝子水浸提液的制备及生物测定
水浸液的制备：采集新鲜供体植株的茎，立即带回实验室，称其鲜质量8 kg，先用适量的去离子水冲洗，再用等量的双蒸水冲洗，沥干表面附着的水分后，放入40 cm×45 cm的不锈钢桶中，以鲜茎∶双蒸水为1∶9的质量比例浸泡48 h，连续浸泡两次，合并浸提液，于4 ℃保存备用。同时称取500 g鲜茎于105 ℃下杀青30 min后，60 ℃下烘至恒质量，计算每毫升浸提液所用的干茎质量，依此将部分原液加双蒸水配成不同质量浓度：1 mg·mL-1、5 mg·mL-1、10 mg·mL-1，4 ℃冷藏用于生测。
生物测定：在直径9 cm的培养皿中放一层定量滤纸， mL的双蒸水润湿，再放入50粒大小均匀、饱满的萝卜种子，摆放均匀，加入适量的处理液，使滤纸保持湿润；以双蒸水为对照，每个处理
322 生态环境 第17卷第1期（2008年1月）
李秋玲等：日本菟丝子对薇甘菊的化感作用 319
生态环境 2008, 17(1): 317-322
Ecology and Environment E-mail: ******@
基金项目：国家自然科学基金项目（30670385）；广东省科技计划项目（2002C60111）
作者简介：李秋玲（1982－），女，硕士，主要从事数量生态学和化学生态学研究。E-mail: ******@
*通讯作者：肖辉林，研究员，博士，E-mail: ******@
收稿日期：2007-12-18
设置5个重复，实验室内自然光培养，用加热器控制室温在25～29 ℃，加湿器控制湿度在65%左右。每天加入适量的处理液并记录萌发（突破种皮2 mm）数，培养4 d后测量根长、苗高，并统计发芽率、发芽指数、发芽势及化感综合效应。
薇甘菊种子的生测方法与萝卜种子的相同，但置于6 cm培养皿中， mL润湿定量滤纸，培养8 d后测量各指标。
日本菟丝子水浸提液的有机萃取物制备及生物活性测定
取“”部分水浸液的上清液，采用Sep-Pak® C18（填料1 g）和SupelcleanTM ENVITM-Chrom P SPE（ g）两种固相萃取小柱用串联的方式提取有机物，之后依次用乙醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇进行洗脱，混合收集，用旋转蒸发仪浓缩、氮气吹干仪吹干，得所需要的有机萃取物，将其加双蒸水配成质量浓度为10 mg·mL-1、25 mg·mL-1、50 mg·mL-1（即分别表示每毫升溶液曾经用10 mg、25 mg、50 mg干茎浸泡），以双蒸水为对照，每种质量浓度5个重复，冷藏备用。
水浸液有机萃取物的化感活性物质生物测定，方法同“”。
化感指标的计算方法
萝卜种子加溶液后，第4天测量根长l、苗高h、并统计发芽率GR、发芽指数GI等指标，薇甘菊则于第8天测量。具体如下。
发芽率：GR=(发芽种子数/供试种子总数)×100%
发芽指数：GI=∑（Gt/t）
图2 日本菟丝子水浸液对萝卜、薇甘菊苗高的影响
Fig. 2 Effect of aqueous extracts of C. japonica on shoots
of and
Gt：在时间t（d）的发芽数；t：培养天数（d）[21]。
化感效应指数（RI）采用Willia