最新植物生理指标测定方法.docx

年最新的栏杆、窗台、女儿墙高度的设计规范
实验一 植物叶绿素含量的测定（分光光度法）
(张宪政， 1992)
一、原理
依据叶绿体色素提取液对可见光谱的汲取，利用分光光度计在某一特定波长测
（ ）外渗电导率
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（ 测定电导率 称取质量
或 （ ） 测定电导率 称取质量 量取体积
（ ）相对电解质溢出率
电解质溢出率（ ） （浸泡液电导率） （煮沸后电导率）×
电解质溢出率

浸泡液电导率

本底电导率

（煮沸后电导率）

本底电导
率 ×
式中： ：组织杀死前外渗液的电导值； 组织杀死后外渗液的电导值。
注： 、预先测定水的电导率
、用吸水纸吸干探头的水分
实验三 植物体内游离脯氨酸含量的测定
一、目的
在窘境条件下（旱、热、冷、冻） ，植物体内脯氨酸的含量明显增添，植物体内脯氨酸含量在必定程度上反应了植物的抗逆性，抗旱性强的品种累积的脯氨酸多。所以测定脯氨酸含量能够作为抗旱育种的生理指标。此外，因为脯氨酸亲水性极强，能稳固原生质胶体及组织内的代谢过程，因此能降低冰点，有防备细胞脱水的作用。在低温条件下，植物组织中脯氨酸增添，可提升植物的抗寒性，所以，亦可作为抗寒育种的生理指标。
二、原理
磺基水杨酸对脯氨酸有特定反响，当用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸溶液中。而后用酸性茚三酮加热办理后，茚三酮与脯氨酸反响，生成稳固的红色化合物，再用甲苯办理，则色素所有转移至甲苯中，色素的深浅即表示脯
氨酸含量的高低。 在 波长下测定吸光度， 即可从标准曲线上查出脯氨酸的含量。
三、资料、仪器及试剂
试剂及配制：
（ ） ﹪酸性茚三酮溶液配制：将 茚三酮溶于 冰醋酸和
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· － 磷酸中（ 原液稀释 倍），搅拌加热（ ℃）溶解，贮于 ℃冰
箱中， 日有效。
（ ）％磺基水杨酸配配制 ：

磺基水杨酸加蒸馏水溶解后定容至

。
（ ） μ · 脯氨酸标准母液配制：精准称取 脯氨酸，倒入小烧
杯内，用少许蒸馏水溶解，再倒入 容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度（为 μ
· － 脯氨酸母液），再汲取该溶液 ， 加蒸馏水稀释定容至 ，即
为 μ · 脯氨酸标准液。
四、实验步骤
、脯氨酸标准曲线的制作
取 支试管，编号，按下表配制每管含量为 ～ μ 的脯氨酸标准液。加入
表中试剂后，置于开水浴中加热 。拿出冷却。以去离子水溶液为空白比较，
在 波优点测定吸光度（ ）值。
试 剂
管
号
脯氨酸标
准液（
）
标准 曲
线 的
蒸馏水（
）
绘制
以
～
冰醋酸（
）
号管 脯
氨 酸
含量 为
横 坐
标， 吸
光 度
磺基水杨酸
值为 纵
坐标，
绘制 标
准 曲
线。
样
﹪酸性茚三酮（
）
品的 测
定
每管脯氨酸含量（μ
）
脯氨酸的提取
称取
～
叶片于
试管
％磺基水杨酸溶液→ 开水浴
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（提取过程中要常常摇动）→冷却过滤于洁净的试管中→脯氨酸提取液。
测定
汲取酶提取液 冰醋酸 ﹪酸性茚三酮→
开水浴 →溶液呈红色→冷却→取上层液于比色杯 处测定吸光度（ ）
值。
五、计算结果
从标准曲线上查出样品测定液中脯氨酸的含量，按下公式计算样品中脯氨酸含量：
×提取液总量（ ）
脯氨酸含量（
－
）＝ ———————————————————
样品鲜重（ ）× 测准时提取液用量（ ）
公式中： －从标准曲线中查得的脯氨酸含量（ ）
实验四 植物体内丙二醛含量的测定
一、原理