菌落总数测定.docx

菌落总数的测定
基础知识：
菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，%。一般用lOOOmL锥形瓶配置，，加入800mL蒸t留水，121C高压灭菌15mino
体样品：称取内加入盐水，拧紧振均匀，制成1:无菌吸管吸取225mL生理盐（瓶内预置适珠）中，充分的样品匀液。吸管吸取1：沿管壁缓慢注盐水的无菌试吸头尖端不要摇试管使其混100的样品匀作，制备10倍液每递增稀ImL无菌吸
5、检验程序菌落总数的检验程序见下图6、。
：以25mL样品置盛有水的无菌锥形瓶当数量的无菌玻璃混匀，制成1:,于盛有9niL生理管中（注意吸管或触及稀释液面），振合均匀，制成1：液。
。
，选择2个、3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，吸取ImL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，^20mL冷却至46C的平板计数琼脂培养基（可放置于46C±C恒温水浴箱中保温）倾注平皿，，将平板翻转，36C土培养48h坐h。
622如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基（约4mL），凝固后翻转平板，。
，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位
（colony-formingunits,CFU）表示。
、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。
，则将每条单链作为一个菌落计数。
7、，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）样品中菌落总数结果。
，按照以下公式计算：
N=EC/（ni+）d式中：
N:样品中菌落数；刀C:平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n1：第一稀释度（低稀释倍数）平板个数；n2：第二稀释度（高稀释倍数）平板个数；d: