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兰科植物组织培养研究进展
摘要 以兰科植物为研究对象,从外植体、培养基、植物生长调节剂、有机添加物和其他影响因素等方面简要阐述了其组培研究进展,旨在为其组培研究提供参考。
关键词 兰科植物;组织培养;外植体发现,愈伤组织的产生是由2,4-D作用产生的。细胞分裂素主要包括 ZT、KT和6-BA[22]。研究者通过多年研究发现,既具有生长素功能又具有细胞分裂素功能的生长调节剂为TDZ[3]。TDZ的首次应用,是Nihar以石斛兰为材料,研究TDZ和6-BA对其组培的效果,结果表明,TDZ的作用效果较6-BA好,但 TDZ浓度要控制在一定的范围,高浓度会抑制茎和芽的再生与增殖[24]。通过使用5种药用石斛的茎段为材料进行培养,发现适合环草石斛、铁皮石斛和金钗石斛腋芽诱导的6-BA/NAA比值为10~20,而束花石斛和马鞭石斛适合的比值为 2~4[25]。周根余等[26]在附加6-BA( mg/L)和2,4-D(~ mg/L)的 MS培养基上,由叶片诱导得到愈伤组织并进一步分化得到离体再生植株,同时指出了2,4-D在促进愈伤组织形成及分化方面的积极作用,NAA在拟原球茎分化方面也有重要的作用,这与Kerbauy的研究结果一致。总体来说,高浓度的细胞分裂素有利于芽的诱导,低浓度则有利于愈伤组织和拟原球茎的诱导,高浓度的2,4-D也有相似的促进作用[22]。 4 有机添加物选择
兰科植物组培过程当中利用较多的有机添加物包括水解酪蛋白、马铃薯汁、椰子汁和香蕉汁等[27-29]。这些物质当中一般含有一定量激素、氨基酸和维生素[27-29]。研究发现,这类物质对利用组培进行植株再生时,有显著的促进作用[3]。曾宋君等[27]研究表明,在组培过程中添加这类物质(椰子水、香蕉汁、马铃薯汁),能够对石斛芽增殖和原球茎的形成产生明显的促进作用。张启香等[28]将铁皮石斛的茎尖作为研究材料诱导产生原球茎时发现,加入定量的土豆汁能够明显抑制褐化的产生,降低了不良影响的产生,同时大幅度提升了原球茎增殖系数。对铁皮石斛丛生芽增殖的诱导研究发现,在培养基中加入香蕉汁、西瓜汁和马铃薯汁有显著的促进作用,同时研究还发现,香蕉汁可以促使丛生芽的增殖和生根[29]。
5 其他影响因素
培养条件也是影响兰科植物组培快繁的关键因子[3],其主要包括pH值、光强、温度、光照长短等外部因子[13-15]。~,但不同的材料和不同的时期对pH值的要求有所不同[13-15]。以铁皮石斛为研究材料对拟原球茎的最适培养条件研究发现,; ;;,拟原球茎出现黄化、死亡等不良状况[26]。还有一个重要影响因子是灭菌时间[26],曾宋君等[27]在对5种石斛兰研究时发现,嫩枝茎尖的最佳灭菌时间应<10 min,选用10% NaClO;兰科植物组培常用的灭菌温度为23~27 ℃,光照强度约36 μmol/(m2·s),光照时间为11 h/d左右。
6 参考文献
[1] 郑洲翔,刘德浩,陈智涛,