实验细胞基本功能-动物生理学实验报告.pptx

实验三细胞基本功能
大学动物生理实验室
目的
蟾蜂
绝对不应期
单相动作电位
相对不应期
双相动作电位
神经标本
坐骨神经兴奋 的传导速度
脑脊髓 神经肌肉标本
原理
为什么选择两栖类的离体组织器官作 为实验半躯干、皮肤和内脏一并 拉剥弃之，仅保留一段腰背部脊柱及两后肢，并 将其放入盛有任氏液的培养皿中。
■洗净手和所用过的用具，以防沾染标本。
■平分标本：沿脊柱正中线至耻骨联合中央将标本 分为两半。放入任氏液中。
图蟾赊坐骨神经腓肠肌标本制备甲、毁脑脊髓 乙、丙剪除躯干前段及内脏丁、去皮肤
I方法及步骤
O游离坐骨神经：任取一标本，用玻璃分针游离坐骨神经腹 腔段。然后换至背侧向上，持玻璃分针沿坐骨神经沟（股 二头肌及半膜肌肌间沟）小心分离坐骨神经大腿段，用剪 刀剪去神经干上备细小分支（切忌撕扯），将坐骨神经中 枢端连带一小块罹骨剪下，游离坐骨薄经至懺关节处。
□分离股骨头：沿膝关节剪去收骨周围的肌肉，将股骨刮净, 保留膝吴节端股骨1cm,剪罢其余部分。
分离腓肠肌：在腓肠肌跟腱下穿线、结扎。提起结扎线， 在结扎线下端剪断跟腱。用玻璃分针游离腓肠肌至膝关节 处，剪去以下部位。制成坐骨神经■腓肠肌标本。
□检验标本：用沾有任氏液的锌铜弓轻触一下坐骨神经，如 腓肠肌发生迅速而明显的收缩，说明标本的兴奋性良好。 将标本浸入任氏液中15分钟，以稳定其兴奋性。
1、股三头肌2、股二头肌3、半膜肌4、股骨
八生物电现象的观察
■将一个神经肌肉标本的神经的一点轻置于臀部 肌肉的损伤部，另一点置于正常部，观察在接 触时是否引起肌肉的收缩？
■将甲标本的神经放在乙标本的肌肉上，再用锌 铜弓刺激乙标本的神经，观察是否引起甲标本 的肌肉收缩。
三、蛙坐骨神经干标本制备
■标本制备方法基本同坐骨神经一腓肠肌标本制 备法，只是为了获得尽量长的神经干标本，在 分离到腓肠肌后再继续沿神经一分支（胫神经） 一直分离至踝关节附近，剪断。
四、仪器联接和调试
-打开Medlab生物信号采集系统软件，任选二个通道 (Medlab-U)和2, 4逋it(Medlab・E)作为记泉信号 的通道或用于刺激信号的监视通道(不应期测定， Medlab-UM用Q9三通将刺澱输岀分成商路一路用 于刺激标本，一路输入4通道，Medlab-E则应按下 CH4上方的R・S键)
■并用高阻抗导线将通道输入口与神经屏蔽盒的引早电 极相连，用刺激导线将Medlab的刺激信号输出口与神 经屏蔽盒的刺激电极相连。
柴昂狒藻罪激电电向)，用膈、片吸去标
五、动作电位和传导速度
■测定参数
釆样参数
刺激器参数
显示方式
记忆示波
刺激模式
自动幅度调节
釆样间隔
25us
主周期
Is
X牺显丞压缩比
2： 1
波宽
0. 1ms
通道
通道2
通道4
初幅度
0. 2V
DC/AC
AC
AC
增量
0. 02V
处理名称
神经干AP
AP传导速度
末幅度
IV
放大倍数
200-1000
200-1000
脉冲数
1
Y轴压缩比
4： 1
4： 1
延时
5ms
实时调节Medlab生物信号采集系统和刺激器的延迟， 使动作电位波形正好岀现在显示屏的适中位置同时调 节刺激强度求出在相应刺激波宽下动作电位产生的阈 强度和顶强度。
双相动作电位的观察：计算双相动作电位时程及上升 加、下降相宽度及幅值，计算自伪迹起点至动作电位 起点麻需飾就间。
把神经干方向倒转后，AP发生何变化？
■传导速度测定：测岀CH2、CH4采样窗之间的时间差: 以刺激伪迹到第一个AP的时间为t1以刺激伪迹到第二 个AP的时间为t2, t=t2・t1；两对引导电极之间的距离 为 2cm。v=s/t
六、不应期测定
■测定参数
显示方式
记忆示波
刺激模式
自动间隔调节
釆样间隔
25us
主周期
Is
X铀显示压缩比
2： 1
波宽
0. 1ms
通道
通道2
通道4
首间隔
10ms
DC/AC
AC
记录刺激标记
增量
-0. 2ms
处理名称
神经干AP
刺激标记
末幅度
1ms
放大倍数
200-1000
5-50
脉冲数
2
Y轴压缩比
8： 1
16： 1
延时
5ms
■・坐骨神经绝对不应期的测定：用“自动间隔调节”方式刺激标 本，强度为顶强度，当串间隔达到一定值时，第二个刺激脉冲也 开始引起一微弱的动作电位，此时的串间隔即为绝对不应期。
■坐骨神经相对不应期的测定：在观察项目19的基础上进一步增大