稳态-瞬态荧光光谱仪操作说明书.docx

稳态瞬态荧光光谱仪(FLS920)操作说明书
一、仪器测试原理
时间相关单光子计数原理是FS920测量荧光寿命的工作基础。
时间相关单光子计数法(time—correlatedsinglephotoncounting)简称“，Source设置为Xe,Em2Detector设置为InGaS,然后点击Apply（注意：将Source设置为Xe之前一定要将A入设置到足够小，此情况下Em2的SignalRate应低于400cps,否则请通知工作人员）；
4）点击直!■-按钮，EmissionScan，进入设置窗口，在General标签内选择L2,选择其它测量步骤与
紫外可见区的稳态荧光测量步骤5〜9相同。
数据处理
1）测量完成后，直接点击保存图标保存原始文件；
2）数据处理的功能都在Data菜单下：
Scale:将当前的谱图坐标乘以输入的数值显示出来
Normalise：归一化，用此功能可以比较峰位是否相同
SubtractBaseline:扣基线
CropRange：设置横坐标显示范围
Differentiate:显示微分曲线
Integrate:积分
Reverse:将横坐标刻度倒过来显示
Correction:谱图校正
3）谱图处理完了以后点击File,选择ExportASCII即可以转换成文本文件。
四、荧光寿命的测量
注：目前仪器的配置只能测量紫外可见区的荧光寿命，FLS920配有两个脉冲灯（纳秒和微秒灯），一般情况下荧光强度在25微秒内衰减到零用纳秒灯，荧光寿命大于25微秒衰减到零用微秒灯，具体设置和步骤如下：
紫外可见荧光寿命（荧光强度在25微秒内衰减到零）测量步骤
1）打开CO1，主机和nF900电源;
2）打开计算机，双击桌面上F900图标进入工作站;
3）点击View菜单，选择nFLampSetup进入窗口，点击SwitchLampOn，观察纳秒灯的频率，注意在此窗口不要更改设置，观察正常后关闭窗口。如果发现频率不能稳定在40kHz,请通知工作人员清
4)
洗氢灯；
点击软件窗口左上角的
按钮，进入SignalRate设置窗口，先将ExcitationWavelength和Eml
,按回车键（Enter）或者点击Apply,再将Source设置为nFLamp，Em1Detector设置为R955，然后点击Apply；
5）打开样品室，放入样品，盖好盖子，输入样品的ExcitationWavelength和Em1Wavelength值，逐渐加大A儿使Em1获得一个合适的SignalRate（一般不超过2000）；
6）点击可按钮，选择ManualLifetime，进入设置菜单，在mode标签内，选择L1,在Excitation栏内设置好激发波长和LightSource,在Emission1栏内设置好发射波长和Detector，将Live选择框勾上，然后开始设置下部的LifetimeSample1菜单，在Rates标签内一边观察StopRate一边调节IrisSetting使StopRate务必在2000以下，再在TimeRange标签内选择一个合适的TimeRange和Channels
（一般为1