狂犬病口服疫苗的诱饵制作及免疫中和抗体检测.pdf

艮疫苗的诱饵制作及免疫中和抗体检测摘要狂犬病狂犬病又名恐水症,即民间所说的疯狗病,是由狂犬病病毒引起的以感染中枢神经为特征的一种人畜共患的传染病。狂犬病病毒能感染所有的温血动物,一经感染发病,几乎ニ劳觯悄壳耙阎5乃劳雎首罡叩传染病之一。据世界卫生组织调查,目前全世界每年死于狂犬病的人数多达耍蠖嗍⑸诜⒄怪泄遥⑶抑饕7⑸诓环⒋锏呐村和山区。目前防治狂犬病的最有效的方法是在暴露后进行高免血清封闭以及免疫狂犬病疫苗,人用的狂犬病疫苗基本都是灭活苗,而动物使用的疫苗主要是弱毒苗,也有少量是进口的灭活苗。由于注射疫苗价格较高,注射不方便等缺点给防治和消灭狂犬病带来了极大的困难。本课题在以前实验室研究的口服疫苗基础之上,根据国外发达国家野外投放口服疫苗的经验,依据犬的生物学特性,利用广西现有的经济资源研制了多种狂犬病口服疫苗诱饵。通过口服途径免疫犬,在第臁臁天、天、天和天采集血液分离血清,用酶联免疫吸附试验涂焖倜庖哂ü庖种剖笛腇觳饬巳庖呖诜呙绾笾和抗体水平,验证了本实验室研制的口服疫苗的效果。觳饨峁示通过口服疫苗免疫的犬产生了中和抗体,抗体水平./,产生了免疫保护作用;通过匝椋灰布觳獾搅酥泻涂固澹泻涂固逅//,两次免疫组中和抗体水平非常接近/,跟阳性对照组结果基本一致,说明口服疫苗对实验动物具有一定的保护作用。觳庹饬街址椒ㄊ笛榻峁嬖谝欢ǖ牟钜欤枰=徊降难芯俊1次实验结果也显示了口服疫苗是有一定的免疫效果的,需要进一步改进提.
高疫苗质量。总之,本实验证明了狂犬病口服疫苗的可行性,为进一步推广和应用口服疫苗免疫野生动物、流浪犬、家犬打下了一定的基础。关键词:狂犬病狂犬病病毒口服疫苗口服疫苗诱饵
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主要英文缩写对照表狂犬病病毒幼仓鼠肾细胞%荧光灶剂量酶联免疫吸附试验胎牛血清磷酸盐缓冲液国际单位培养基碱基对千碱基对氨苄青霉素世界卫生组织世界动物卫生组织核蛋白磷蛋白基质蛋白糖蛋白快速免疫荧光灶抑制实转录酶大蛋白.—瓸
一、综述部分狂犬病病毒的病原学狂犬病又名恐水症,是由狂犬病病毒性的、世界性传染病【¨。我国已将其列为国家重点防治的二类动物传染病。有关狂犬病狂犬病具有非常高的致死率,一旦感染发病,死亡率几乎达到ァ?袢〔《主要侵害人和动物的中枢神经系统,而中枢神经系统由于血脑屏障的存在,阻止了循环具【俊6锓⒉『笾饕V⒆词敲ǚ⑴盥遥闹楸裕∪饩仿危飨眩刃朔芎笠钟糇白、磷蛋白和嗑勖福纬闪撕颂呛说鞍【2⑶抑挥行纬闪撕颂呛蛋白运的病毒才具有转录和复制功能。核糖核蛋白的外面为基质蛋白,基质蛋白狂犬病口服疫苗的诱饵制作及免疫中和抗体检测琑引起的人畜共患的、接触的记载已经有两千多年的历史,但是预防和治疗狂犬病一直困扰着整个人类社会【俊中狂犬病毒特异性免疫因子到达被感染的中枢神经组织,所以一般的治疗性药物和免疫因子很难通过,一旦发病,最终结果就是将以死亡而告终【R舱且蛭?袢〔《主要侵害中枢神经系统,所以利用重组狂犬病病毒是研究神经组织的一个最好的示踪工后呼吸和循环衰竭而死亡。有实验表明通过破坏银毛蝙蝠的血脑屏障能够明显的降低动物的死亡率庖仓皇窃诙锷砩纤龅氖笛椋匀说闹瘟苹怪皇峭A粼诶砺鬯健欧洲狂犬病病毒的主要携带动物是赤狐,美国主要是浣熊和臭鼬,而在非洲和亚洲主要为犬。狂犬病病毒外形呈子弹状,直径,长约懊娑墼玻竺平直,是一种典型的嗜神经病毒。与所有的《鞠嗬嗨疲《净蜃橥饷嬗泻说压缩着蛊浔3种旅苄裕榷瞬《镜男翁2《镜耐饪怯兄仕ú隳ぐ其上镶嵌有虮嗦氲奶堑鞍兹厶寮豢帕#梢允侗鹣赴ど系目袢〔《臼体,如图—。狂犬病病毒属于弹状病毒科袢《臼2环纸段单股负链《荆《净蜃槿ǔぴ,编码五种结构蛋白。从说’端分别为:核蛋白⒘椎鞍譖、基质蛋白⑻堑鞍譍和依赖腞多聚酶。广西大粤%页士学位论文
核蛋白狂犬病病毒的核蛋白由虮嗦耄ǔ,编码霭被幔肿恿,核蛋白紧紧包裹病毒鞍字饕W饔檬呛筒《镜腞结合形成核糖核蛋白体员;げ《镜腞不受核酸酶的破坏【。只有衣壳化的狂犬病病毒基因组才具有转录、复制的功能。也有报道用庖吆镒幽芄皇蛊洳钥箍袢〉免疫保护【俊A硗釴蛋白还能刺激细胞免疫。在免疫时,细胞免疫早于中和抗体的产生,所以,动物免疫时前期核蛋白起着重要的作用【】。在制作基因工程苗时,和蛲泵庖叨锬芟灾岣叨锏闹泻涂固逅健T诳袢《镜幕蜃橹校琋基因的保守性最高,也是狂犬病病毒属分型的重要依据俊广西大掌硕士学位论文狂犬病口服疫苗的诱饵制作及免疫中和抗体检测图狂犬病结构示意图图袢〔《净蜃橥:簎甆.
,起连接湍在调节狂犬病毒转录、复制的平衡方面也起着重要的作用,并且在转录和复制的过程当中,转录的抑制是伴随着复制的增加共同完成这种调节的。至于其他的