四神片指纹图谱的建立方法.docx

四神片指纹图谱的建立方法
四神片指纹图谱的建立方法
四神片制剂指纹图谱的建立方法，包括制备成每ml含补骨脂素、异补骨脂素、五味子醇甲10--10g，用甲醇超声提取。过滤后得到的供试品溶采用液相色谱法测定指纹图谱的色谱条件:色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相由流动相A和流动相B组成的梯度洗脱液，流动相A为乙腈，流动相B为水；检测波长220nm~360nm ;柱温20~50°C ;~ ;时间30~90min。
[0011]上述步骤(2)供试品溶液的制备是:-10g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇lO-lOOml，密塞，称定重量，浸泡，超声处理后，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
[0012]上述步骤(3)测定指纹图谱是:精密吸取供试品溶液5~25 μ I注入高效液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。
[0013]上述步骤(4)所述色谱条件是:流动相为水与乙腈组成的梯度洗脱液，水95-20%:乙腈5-80%，柱温35°C，检测波长为246nm，，分析时间为70min。
[0014]上述步骤(1)所述对照品溶液的制备是:精密称取补骨脂素、异补骨脂素、五味子醇甲对照品适量至于容量瓶，用甲醇稀释至刻度，配制成每1ml含补骨脂素30 μ g、异补骨脂素30 μ g、五味子醇甲50 μ g的溶液,作为对照品溶液；
上述步骤(2)所述供试品溶液的制备是:，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，浸泡，超声处理45分钟(50kHz，室温)，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
上述步骤(3)所述色谱条件为:色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相为乙腈与水组成的梯度洗脱液；柱温:35°C;检测波长246nm ;流速: ；分析时间:90min
上述步骤(4)所述的梯度洗脱，优选梯度洗脱程序以如下体积浓度配比进行。流动相A为乙腈，流动相B为水。
[0015]
【权利要求】
，采用液相色谱法，其特征在于:包括以下步骤: (1)对照品溶液的制备:分别精密称取补骨脂素、异补骨脂素、五味子醇甲对照品适量，用甲醇配制成10?100 μ g/mL的溶液,作为对照品溶液； (2)供试品溶液的制备:?10g，用甲醇超声提取，提取液用微孔滤膜滤过，即得供试品溶液； (3)采用液相色谱法测定指纹图谱:精密吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱； (4)采用液相色谱法测定指纹图谱的色谱条件:色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相由流动相A和流动相B组成的梯度洗脱液，流动相A为乙腈，流动相B为水；检测波长 220nm ?360nm ;柱温 20 ?50°C ;流速 ?L 5mL/min ;时间 30 ?90min。
，其特征在于:所述步骤(2