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荆芥挥发油的抑菌作用.doc


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荆芥挥发油的抑菌作用
(彭国宝 安徽省蚌埠第20中学 233000)
指导教师:程双怀博士
摘要:植物中有效成分的提取与再研究对充分利用植物资源具有重要意义。荆芥是唇 形科植物,具有特殊的芳香气味,含芳香油。本文试就荆芥的有效成分——、、PH ±。
2.
95%乙醇
丙酮
2. 1. 5仪器设备
玻璃烧杯(500ml)2个、(1000ml)l个、培养皿(90mm)6个、试管4只、滴管4只、量筒 (100ml) 1个、容量瓶(100ml) 1个、试剂瓶(200ml)2个、移液管(5ml) 1个、(10ml)l个、玻璃 棒、移液枪、镶子、棉塞、滤纸、钻孔器、PH试纸、尺子、接种环、三角涂棒、牛皮纸、 研钵、托盘天平、电子天平、电热恒温干燥箱、蒸馅装置、全自动灭菌锅、无菌操作台、 生化培养箱、循环水式真空泵


生物材料中的可溶性物质即欲提取物通常存在于细胞内,细胞膜便产生一种不同于 一般情况下的扩散阻力,致使提取其中有效成分的浸取速率较小,提取的过程实质是溶 质从植物体内部向溶剂中转移的传质过程,研究有效成分就须将它们提取分离出来⑶。目 前,较常用的提取方法有:浸渍法,水蒸气蒸馅法,有机溶剂萃取法等也。
由于荆芥属于唇形科,气味芳香,多含挥发油,根据荆芥的特点以及实验室现有的 条件,主要采用水蒸气蒸馅法提取挥发油回。
从市场买来荆芥,用水洗涤干净后再用蒸馅水冲洗两次,然后置烘箱内烘干,取出, 冷却后于研钵中研成粉末。称取20g粉碎的原料装入1000ml的圆底烧瓶中,加入450ml的 蒸馅水,然后连接好蒸馅装置直接用火加热,水蒸气将原料中的精油蒸出,冷却蒸出的 水蒸气,收集液体中的油层便得到粗品精油,储存待用。
2. 2. 2培养基的制备
用电子天平称取9g营养琼脂粉末倒入500ml大烧杯中,加入200ml蒸馅水,放在石棉 网上用电炉加热,并用玻璃棒不断的搅拌,待粉末完全溶解至透明后停止加热,倒入三
角烧瓶中,塞上棉塞,用报纸包好和培养皿、试管等所需灭菌的仪器一起置于全自动灭 菌锅内12rc-128°c灭菌2h。灭菌完成后取出置于无菌操作台中,于火焰旁倒入培养皿和 试管中,培养皿倒量以铺满皿底为限,平放,待其充分凝固。试管倒量以1/4试管容积为 限,斜放,待其充分凝固制成斜面。

在无菌操作台中,供试的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌菌种分别接种到新鲜试管斜面 培养基中使之活化,培养一天,取一定量已活化的供试菌分别置于装有9ml无菌水的试管 中,制成菌悬液备用。
2.
70%酒精:取95%乙醇74ml于100ml容量瓶中,然后加入蒸馅水定容至100ml,反复摇 匀装入试剂瓶中备用。
不同浓度挥发油:用丙酮做溶剂,制0. 5%、1. 0%、5. 0%、10. 0%、15. 0%、20. 0%、25. 0%、 30. 0%八个梯度的挥发油溶液。分别用移液枪移取lul、2ul、10ul、20ul、30ul、40ul、 50uK 60ul的挥发油注入离心管中,再用移液枪分别移取200ul的丙酮注入离心管摇匀就 %、%、%、%、%、%、2

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  • 时间2022-06-19
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