中药活性指标成分阿克苷制备及鉴定.docx

附件1
中药活性指标成分阿克昔(Acteosid)的制备与鉴定
何江1,胡小鹏2,邱榕珠3,马文杰3,李涛2
深圳大学医学院
深圳大学生命科学学院
深圳大学化学与化工学院
摘要：本实验以苦丁茶木犀科植物紫茎女贞(LigustruC)检测。检测条 件为：
仪器：安捷伦1200(Agilent 1200)高效液相仪
检测波长：227 nm
分析柱：C-18 column (Hypersil ODS, 250x MM)
柱温：4°C
流速：1 ml/min
样品浓度：1 mg/ml
进样量：5 pl
洗脱条件：起始洗脱比例为 H2O—acetonitrile (80:20,v/v);时间程序为
0—25 min，洗脱比例由 0—100% acetonitrile
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图2 M的高效液相纯度检测
通过高效液相色谱检测，从苦丁茶紫茎女贞叶中分离纯化得到的M其纯度 为％。
四、结构鉴定
[3]
1) FeCl3显色：将少许M试样溶于10 ml适量的甲醇中，用毛细管取样，并在 硅胶TLC板上点样，用风筒将斑点吹干，然后用10% FeCl3水溶液在TLC上喷
雾，此时观察到斑点呈墨兰色。
2)KOH水溶液显色：取少许M试样放入一小试管中，用甲醇溶解，然后滴加
10% KOH水溶液二至三滴，溶液呈深黄色。
比旋度测定：[a]D24— (c , MeOH)
紫外光谱 入max (EtOH) nm，(log s)(如图3所示)
在210—240 nm区间，出现225和248 ()吸收，表明化合物M结构中含 有a、0不饱和酰基和苯环官能团。288 ()为苯环的弱吸收甙，而335 ()吸收 为结构中的兀―兀*电子跃迁的吸收带峰。
vmaxKBr, cm—1 (如图4所示)
3450吸收宽峰表明M分子中存在多一OH基团，1690与1660为共轭a、0 不饱和酰基的特征吸收峰，1510和1440为双键和苯环骨架振动吸收。

图4化合物M的红外吸收光谱
5. 1H—NMR核磁共振谱
如图5所示，化合物M的1H—NMR谱图在一ppm低磁场共振范围内出现 6个苯环质子信号，属于两个ABX自旋系统。8和的两组二重峰，J = Hz，为 咖啡酰基的反式双键质子信号；而8(2H, J = Hz)、(1H, t, J = Hz)和(1H, m) 分别为苯乙醇基质子信号。在1H—NMR谱中可观察到P-D-葡萄毗南糖基和a-L- 鼠李毗喃糖基的端基质子信号。
化合物M的1H—NMR化学位移信号归属如下：
Aglycone (3,4-dihydroxyphenylethyl): (1H, d, J = Hz, H-2), (1H, d, J = Hz, H-5), (1H, dd, J = , Hz, H-6), (2H, t, J = Hz, H2-7), (1H, t, J = Hz, H-a), (1H, m, H-8b)
Glucosyl: (1H, d, J = Hz, H-1), —(m, 2，,3' and 5，)， (1H, t, J = Hz, H4), (1H, dd, J = 12, Hz, H-6'), (1H, dd, J = 12, Hz, H-6')
Rhamnosyl: (1H, d, J = Hz, H-1”), —(m, 2" and 3”), (1H, t, J = Hz,
H-4”), (m, H-5"), (3H, d, J = Hz, H3-6")
Caffeoyl: (1H, d, J = Hz, H2〃)，(1H, dd, J = Hz, H-5"), (1H, dd, J =,
Hz, H-6”，)，(1H, d, J = Hz, H7〃)，(1H, dd, J = , Hz, H-8") 图5化合物M的1H NMR图谱
(lH1dd1J=0 12OHE1H-6)
. =H D Hz. H-8,,r：i
6. 13C-NMR 核磁共振谱
化合物M的13C NMR图谱(见图6)显示29个碳信号，与文献报道数据比较［4］，其碳 化学位移信号得到归属：
Aglycone (3,4-dihydroxyphenylethyl): (C-1), (C-2), (C-3), (C-4), (C-5),
121 (C-6), (C-7), (C-8)
Glucosyl: (gluC-1‘)， (gluC-2‘)， (gluC-3‘)， (gluC-4‘)， (gl