草莓快速繁殖体系的建立.docx

草莓快速繁殖体系的建立
 
 
翟婷婷　屈海泳　刘成连等
Reference：以草莓（Fragaria ananassa Duch.） 品种章姬和丰香的匍匐茎尖为试验材料，诱导出丛生芽后进行增殖培养和生根） ℃。
茎尖增殖培养 增殖培养基以MS为基本培养基，加入蔗糖30 g/L，琼脂7 g/L，另外加入不同浓度的6-BA（、、、 mg/L）与NAA（0、、 mg/L）组合，调整培养基至pH ，以MS培养基为对照，共12个处理。将培养基在116 ℃下灭菌30 min后备用。
初代培养40 d后，选取长势一致的健壮组织培养苗，切去老叶后接入上述增殖培养基中，每种处理设8次重复，每重复4个外植体，后置于温度为（25±1） ℃的组培室中光照培养16 h，40 d后调查生长情况。用直尺测量草莓组织培养苗的高度，并统计其增殖系数。增殖系数=增殖苗数/接种苗数×100%。
生根培养 在原有试验的基础上，基本培养基以1/2 MS为主，加入蔗糖30 g/L，琼脂7 g/L，附加不同浓度（、、、、 mg/L）的NAA或IBA，调整培养基至pH ，同时比较基本培养基为MS与1/2 MS时的生根情况，共11个处理。将生根培养基在116 ℃下灭菌30 min后备用。endprint
选择苗高2 cm左右、长势一致、生长健壮的草莓组织培养苗，将其接入上述生根培养基中，每种处理设8次重复，每重复4个外植体。45 d后观察草莓苗的生根情况。待苗长至高7 cm，挑选长势良好的生根壮苗进行驯化移栽[11]。先将生根草莓苗的组织培养瓶盖打开，在室内放置1～2 d后，将组织培养苗根部附着的培养基洗净，栽植于无菌基质中。基质采用草炭∶蛭石∶珍珠岩=2∶1∶1的比例混合（121 ℃，20 min灭菌）。小苗栽植后立即浇透水，置于
培养箱中。培养箱设置温度为（25±2） ℃，湿度保持80%～85%。待苗长至20 cm时即可移栽至大田。
2 结果与分析
不同激素组合及浓度对草莓组织培养苗增殖的影响
由图1可知，不同处理对草莓组织培养苗增殖影响极显著（P
综合增殖系数与苗高两因素可以看出，最适宜章姬增殖的培养基为MS+ mg/L 6-BA + mg/L NAA，， cm，并且组织培养苗健壮，长势好（图3A）；最适宜丰香增殖的培养基为MS+ mg/L 6-BA+ mg/L NAA，， cm，长势好（图3B）。由此可以看出，不同基因型的草莓增殖其所需激素浓度不同。
不同激素种类及浓度对草莓生根的影响
由图4可知，对于品种章姬，处理1/2 MS+ mg/L IBA根数最多，，与其他处理间差异均达极显著（P<）。
综合根数及根长2个因素可得，最适宜章姬生根的培养基是1/2 MS+ mg/L IBA，， cm，生根情况良好；最适宜丰香生根的培养基是 MS+ mg/L IBA， 根， cm，生根情况良好。
3 讨论
在草莓的组织培养中，花药培养也是一种脱毒繁殖的途径，但是草莓花药培养整体分化效率不高，主要限制因素是花药愈伤分化能力低[12]，因此茎尖分生
组织脱毒繁殖仍然是草莓生产上除传统繁殖方法外种苗最主要的来源[1]。果树组织培养的成功与否最主要的影响因素还在于适宜的激素种类和浓度配比[13]。各种激素对草莓组织培养快速繁殖的研究中，之前学者侧重对增殖系数考察[14，15]，而本研究认为增殖系数与苗高对于草莓的增殖同等重要，若增殖系数过高会导致组织培养苗小[8]且玻璃化现象严重，出现难以生根成活的现象[16]。本研究结果表明，在相同培养条件下，增殖系数在品种间存在极显著差异，最适宜草莓品种章姬增殖的培养基为MS+ mg/L 6-BA + mg/L NAA，， cm；最适宜草莓品种丰香增殖的培养基为MS+ mg/L 6-BA+ mg/L NAA，， cm。
徐东生[17]认为草莓在分化培养基中也能生根，但发根不齐，根的长势差，以移入生根培养基生根为好。本试验结果表明，草莓生根较易，最适宜草莓品种章姬生根的培养基是1/2 MS+ mg/L IBA，， cm；最适宜草莓品种丰香生根的培养基是MS+ mg/L