两肾一夹.doc

大鼠急性肾型高血压模型血压的测定及其影响因素[ 目的要求]1. 学习急性实验性肾型高血压大鼠模型的制备方法。 2. 学习并掌握测量肾型高血压模型大鼠动脉血压的原理和方法。 3. 观察降压肽和海洋活性提取物对动脉血压的影响。[ 基本原理] 大鼠肾性高血压实验模型是研究高血压病及降压药物常用的实验手段, 通过一侧肾动脉阻塞使肾血管流量减少, 导致肾缺血, 肾素分泌量增加, 引起血压升高。大鼠肾性高血压病模型是研究肾性高血压病及其并发症的经典的动物模型。本实验室应用液导系统直接测定动脉血压。即由动脉插管与压力传感器连通, 其内充满抗凝液体, 构成液导系统, 将动脉插管插入动脉内, 动脉内的压力及其变化, 可通过封闭的液导系统传递到压力传感器,并由计算机采集系统记录下来。[ 动物与器材] Wistar 大鼠、大鼠固定板、常用手术器械、止血钳( 4~6 把)、眼科剪、支架、双凹夹、动脉插管、三通管、动脉夹、计算机采集系统、压力传感器、人体血压计、保护电极、照明灯、纱布、棉球、手术缝合线、注射器( 10ml 、 5ml 和 1ml ) 、生理盐水、乌拉坦( 10% )、肝素( 200U/ml )、降压肽( 100mg/ml )、海洋活性提取物( 100mg/ml )。戊巴比妥钠: 40mg/k g 体重, 250g 体重注射 。戊巴比妥钠溶液浓度为 20mg/kg [ 方法与步骤]1. 实验仪器的准备打开计算机采集系统,接通压力传感器。从显示器的“试验项目”中找出“循环实验”的“家兔血压的调节”条,使显示器显示压力读数。 2. 连通液导系统并制压将压力传感器的下方支管, 通过输液管连接三通管, 再接连接动脉插管。上侧管供制压时排除管内空气使用。先用装有 10mL200U/mL 的肝素的注射器, 通过三通管向连接动脉插管的输液管内推注, 使之充满液体后, 关闭连接动脉插管的三通接口。然后继续向三通管内推注, 直至充满压力传感器的上方支管( 注意: 液导系统内不可有气泡)。继续向三通管内推注, 同时观察显示器上压力变化。当加压到 120mmHg 时即可关闭三通管。观察压力是否变化, 如果压力下降, 则需要检查液导系统的漏液原因, 并重新制压。调解血压显示器的灵敏度,使 30-130mmHg 的变化都能在显示器上明显的反映出来。将动脉插管的导管内充满肝素钠溶液。 3. 动物的准备(1 )取健康大鼠,腹腔注射乌拉坦麻醉,仰卧固定于手术台。剪去腹部手术野毛,皮肤消毒后于剑突下 延腹中线剪开皮肤及肌层, 右手指伸入腹腔摸着肾脏, 左手指从腹部外侧配合将肾脏轻轻挤出, 用浸有生理盐水的纱布包住, 然后用直头眼科镊小心分离肾蒂部筋膜,沿肾静脉下方分离肾动脉,在近主动脉端用动脉夹夹住。最后缝合手术切口。麻醉大鼠,仰卧固定于手术台,在紧靠喉头下缘,沿颈部偏左作一长度约 5cm 的皮肤切口, 然后用止血钳或手术剪分离皮下结缔组织后, 夹住少许皮肤并向两侧分开创口。分层分离肌肉,只至看见肌肉层下方的气管。大鼠颈部的神经、颈动脉被结缔组织膜包在一起, 形成血管神经束, 位于气管两侧。用玻璃分针轻轻划开局部结缔组织束膜, 仔细辨认颈主动脉, 呈红色, 有波动, 壁有较强的弹性。用玻璃分针轻轻挑起分离后的神经, 再由弯头眼科镊由神经下方穿过,将一浸过生理盐水的丝线放于