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一种定量检测脂蛋白a的检测试剂盒的制作方法
一种定量检测脂蛋白a的检测试剂盒的制作方法
本发明涉及生物检测领域，特别是涉及一种定量检测脂蛋白a的检测试剂盒及其制备方法和用途。本发明提供一种定量检测脂蛋白a的检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡不同标
准品滴加到试纸卡上，分析处理建 立定标曲线（T/C信号值与标准品真实值的关系），再将检测样品时获得的T/C值与标准曲 线比较，即可获得检测样品中的Lp-a含量。
[0021] 本发明第二方面提供所述的定量检测脂蛋白a的检测试剂盒的制备方法，包括如 下步骤：
[0022] 1)用荧光微球标记的Lp-a抗体溶液喷涂经预处理的金标垫，制得包含Lp-a抗体 的金标垫；
[0023] 2)在硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂Lp-a抗体及羊抗鼠抗体，制得 包被后的硝酸纤维素膜；
[0024] 3)将样品垫、步骤1制备金标垫、步骤2制备的硝酸纤维素膜、吸水垫依次粘贴在 底板上，切裁制得检测试纸卡；最后将检测试纸卡装入卡壳制得检测试剂盒。
[0025] 优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本发明中所述的金标垫 还经过预处理，预处理中所使用的预处理缓冲液包括下列组分：水苏糖、明矾、果糖二磷酸 钠、六偏磷酸钠和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为 3. 5 - 7. 5g/L，缓冲液的 pH 值为 7. 2 - 7. 6。
[0026] 优选的，各组分在缓冲液中的浓度为：
[0027] 水苏糖 -3g/L; 明石凡 -lg/L； 果糖二磷酸钠 -3 g/L; 六偏磷酸钠 - g/L; 甘氨酸 -;
[0028] 所述预处理缓冲液的溶剂为水。
[0029] 所述预处理的具体步骤为：将金标垫在预处理液中浸泡2h，取出放于37°C烘干。
[0030] 本发明第三方面提供所述定量检测脂蛋白a的检测试剂盒在脂蛋白a检测领域的 用途。
[0031] 本发明所提供的定量检测脂蛋白a的检测试剂盒首次将脂蛋白a通过荧光微球 免疫层析技术进行检测，兼具灵敏性和特异性，能够快速评估冠心病相关临床症状。此外， 所述检测试剂盒具有操作快速简便、结果准确、经济适用等优点，受血清（或血浆）严重血 月旨、溶血干扰小，当血清（或血楽）血红蛋白彡500mg/L、甘油三酯彡50mg/dL时、胆红素 彡15mg/dL，对准确度的影响变差50,即认为试剂盒能够 用于该浓度下的检测。
[0056] 采用5% BSA生理盐水溶液作为空白样本，空白样本应不含被测物。取0. 02-1. 0 ng/mL梯度浓度的脂蛋白a已知血样进行灵敏性检测，每间隔0. 02ng/mL设置一个梯度，每 个梯度设置20个样本，记录检测结果。结果显示实施例1所制备的试纸卡最低检测限为 0. 06ng/mL，对比例试纸卡的最低检测限高于I. Ong/mL。
[0057] 综上所述，本发明所提供的检测试剂盒具有良好的抗干扰性和特异性，且具有很 好的灵敏性，阴性本底更低，有效克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。
[0058] 上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟 悉此技术的