植物离体快繁技术.ppt

第三章 植物离体快繁技术
第一节 离体快繁的方法
一、植物的离体快速无性繁殖
1、概念
利用离体培养技术，将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织或细胞进行离体培养，在短期内获得大量遗传性一致的种类和浓度：提高生长素相对浓度、降低细胞分裂素的浓度、无激素
调节基本培养基的营养组成：1/2或1/4MS
适当降低渗透压：根分化低于芽分化的渗透压
添加活性碳：造成黑暗的环境
培养基内诱导
基质生根法：糠灰、蛭石、珍珠岩、沙
嫁接生根法：无籽西瓜嫁接在瓠子上长根
诱导根分化的方法：
滤纸桥瓶外生根技术
1、实验条件
在温室内搭建塑料拱棚，长2m，宽1m，在薄膜上面加上微喷设施，以便调节温度，在拱棚的一侧设有加湿器的通道，允许湿雾进入棚内，并根据光强在拱棚上搭遮阴网。
2、操作过程
取材：-，余下部分可作继代扩繁培养。
生长素处理：所剪取茎段的基部在一定浓度的生长素蘸过后，轻轻插入滤纸桥中，放入棚内有一定营养液的的长方形容器内，然后启动调控措施。
保养：在操作过程当中，要对茎段不时的喷水雾以防止失水过多而萎蔫，通过观察茎段的生根情况，并根据所出现的情况及时调整光强，温度、湿度，筛选出最佳的生根条件。
（4）小植株的驯化和移栽
日光锻炼，恢复叶绿体光合作用
湿度锻炼，打开培养瓶1~2周
冲洗干净培养基
选择基质
保湿，移栽10天内空气相对湿度应在80%~90%
注意事项
在培养中，如果出现杂菌污染，应立即将该培养物倒掉。对于愈伤组织或试管苗长势良好，仅有局部杂菌污染的试管或三角瓶，也可在无菌条件下，将愈伤组织或试管苗取出，重新放入装有相应培养基的试管或三角瓶中，继续培养。
炼苗后，也可先将试管苗浸泡在含有生长素的清水中1-2h，再移栽到驯化苗圃中。
在驯化过程中，要注意防止各种病虫害的发生。
芦荟
芦荟
在二战中，美国在日本的长崎和广岛投下两颗原子弹后，大量的幸存者被原子同位素核辐射灼伤。任何药物都医治无效，医学专家也没切实可行治疗方案，后来有人提议用芦荟绞汁抹于伤口，并开始了试用，惊人的奇迹出现，伤口竟愈合的又快又好，比其他药物再生速度要快２倍以上，甚至不留痕迹。
素有“万应良药”、“天然美容师”、“家庭医生”等美称
美容、药用的芦荟种类
库拉索芦荟、巴巴多斯芦荟，俗称美国芦荟
元江芦荟
树芦荟
好望角芦荟
华芦荟
皂质芦荟
芦荟的用途
用于风湿症、体内外各种溃疡、高血压、糖尿病、癌症、胆固醇疾病等患者。
芦荟中的脂肪酸可以有效地防治皮肤病症，因此在治疗烧伤、割伤、擦伤、皮肤病、伤疤等具有显著的疗效
芦荟可以促进皮肤细胞更新。芦荟对皮肤的渗透性强(可深达七层细胞组织) ，广泛用于化妆品和保健品等。
芦荟可以有效地清体内自由基， 排除体内有害物质，促进新陈代谢。
芦荟组织培养快速繁殖技术
芦荟不能自花授粉结实，用种子繁殖非常困难。
繁殖方法主要是分株和分蘖，难以快速、大量地繁殖种苗
对芦荟茎尖进行组织培养快速繁殖试管苗，可在短期内繁殖上百万株的种苗，成本低，效益高
材料和培养基
l0-l5cm高的芦荟幼苗
愈伤组织诱导培养基为MS+(1-6mg/ )BA+()NAA
分化培养基为MS+(2-4mg/L)BA+ (-)NAA
生根培养基为MS+()IBA+(2一5mg/L)PP33
1、诱导愈伤组织
芦荟幼苗在清水中冲洗，取茎尖部分，再冲洗1-2次，淋干。
在超净台上，先用75%的乙醇将茎尖浸泡30-60s，再用升汞浸5-l0min，最后用无菌水冲洗数次。
用解剖刀取出包括茎尖生长点的组织切块，接种到愈伤组织诱导培养基上。
光照 10-12h，光照度为 1000一2000Lx，温度(25士)2℃。15-25d后，外植体膨大，形成愈伤组织。
愈伤组织形成1周后，就可将愈伤组织转管进行继代培养或分化培养。
2、继代培养
无菌水反复清洗附着于愈伤组织的培养基
将愈伤块切成数个小块，再接种到装有愈伤组织诱导培养基的三角瓶中，在相同的培养条件下继续培养。
通过继代培养，可繁殖出大量愈伤组织来，用于分化培养。
3、分化培养
将愈伤组织用无菌水洗净，切成小块，接种到分化培养基中。
30-50d后，愈伤组织就可分化出芽，并继续长出小叶片。
4、生根培养
幼苗叶片长到3cm左右时，将幼苗放入装有生根培养基的三角瓶中培养。
大约半个月后，幼苗即可生根。
5、炼苗
当幼苗的根长到一 定长度，幼