用庆大霉素抗性筛选法选育西罗莫司高产菌株.doc

1 用庆大霉素抗性筛选法选育西罗莫司高产菌株【摘要】用紫外线对吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)NP03 进行诱变,再采用庆大霉素抗性筛选法进行处理,剂量分别为 0、 、 、 和 μ g/ml , 共获得 113 株抗性突变株, 其中西罗莫司产量高于出发菌株的有 51 株,突变株 NP03 拟 74# 的生产能力达到出发菌株的 134% ,且遗传特性稳定。【关键词】西罗莫司; 庆大霉素; 抗性筛选; 遗传稳定性 Screening of mutant overproducing sirolimus with gentamicin resistance method Zhang Li and Jia Xiao 拟 jing 2 (New Drug Research and Development Center, North China Pharmaceulical Co., Shijiazhuang 050015) ABSTRACT After the spores of Streptomyces hygroscopicus NP03 bEing treated with UV, asa mutagen one hundred thirteen sirolimus 拟 producing strains were obtained by gentamicin resistance screening. The treatment dose was 0, , , and μ g/mg respectively. The sirolimus yields of 51 mutants were higher than that of the original strain. Among them, the yield of #NP03 拟 74 was 134% as high as original strain ′ s, and the characteristic can be steadily inherited. KEY WORDS Sirolimus; Gentamicin; Resistance screening; Hereditary stability 免疫抑制剂在器官移植排斥反应的预防和治疗中有极其重要的作用。自 20 世纪 70 年代环孢素 A 用于临床以来, 器官移植的成功率大大提高, 但探求新的、安全有效的免疫抑制剂的工作一直在继续。西罗莫司(sirolimus) 是由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus) 产生的大环内酯类抗生素, 1977 年 Morris 等 3 首先发现其具有免疫抑制作用, 1989 年开始把西罗莫司作为治疗器官移植的排斥反应的新药进行使用, 临床应用显示它具有很好的抗排斥作用, 与环孢菌素A 和他克莫司(FK506) 等免疫抑制有良好的协同作用, 是一种疗效好、低毒、无肾毒性的新型免疫抑制剂[ 1,2] 。西罗莫司除用于器官移植抗排斥药物外, 还可用于抗真菌、心血管支架涂料、新合成 I 拟 779 的原料药,预防和治疗系统性红斑狼疮、胰岛素依赖型糖尿病等,应用前途广泛。本