夏天无高效液相色谱指纹图谱研究.doc

夏天无高效液相色谱指纹图谱研究
　　【摘要】目的研究夏天无药材的高效液相色谱〔HPL〕指纹图谱，为科学评价及有效控制其质量提供理论方法和参考数据。方法采用HypersilBDS18柱，〔250×,5μ〕;以乙腈-水〔30∶70,每1罂粟科的多种植物中，单一原阿片碱的定性与定量并不能确切地反响夏天无药材的质量。因此我们对夏天无进展指纹图谱研究，建立一种可以比拟全面地反响其质量，并能对其质量进展控制的行之有效的方法。
　　1仪器与药品
　　
　　ETTLERAE240型十万分之一天平〔瑞士〕；KQ3200超声波清洗器〔昆山市超声仪器〕；P200Ⅱ高效液相色谱仪、UV200Ⅱ紫外检测器〔大连依利特分析仪器〕；Krasil18柱〔安吉伦公司〕。
　　
　　夏天无药材〔由江西天狮集团提供，江西中医学院中药鉴定教研室鉴定为正品，〕；延胡索乙素对照品〔中国药品生物制品检定所，批号0726-200107〕；原阿片碱对照品〔由江西省药检所提供〕；延胡索药材〔购自南昌市黄庆仁青山路分店，江西中医学院中药鉴定教研室鉴定为正品〕；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其它试剂均为分析纯。
　　2方法与结果
　　：用十八烷基键合硅胶为填充剂〔HypersilBDS18柱，250×，5μ〕；乙腈-水〔30∶70，〕；检测波长281n；·in-1；柱温30℃；进样量5μl。
　　
　　分别比拟了甲醇-水-10%醋酸系统，甲醇-醋酸钠-冰醋酸系统，甲醇-水系统，乙腈-水系统，并采用单纯格子设计法进展优化实验。结果乙腈-水〔缓冲盐〕30∶70系统别离度好，应选择其作为流动相。
　　，254，281n3种波长做为考察。在此3个波长下的HPL图谱中均有一样数目的色谱峰。但是281n波长下，峰强度最大，因此选定281n作为检测波长。
　　，结果见图1～3及表1。
　　从图1～3及表1可以看出，索氏提取的HPL图更符合指纹图谱的要求，因此样品的处理选用索氏提取加热回流4h。表1提取效率比拟〔略〕
　　
　　，精细称定，加硅藻土1g拌匀，置索氏提取器中，加浓氨试液1l，氯仿120l，水浴回流提取4h，提取液浓缩至近干，残渣用适量甲醇使溶解转移置10l容量瓶中，稀释，摇匀，即得。
　　，精细称定，，即得延胡索乙素对照品溶液；另取原阿片碱对照品适量，精细称定，，即得原阿片碱对照品溶液。
　　
　　精细汲取供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，记录1h的色谱图。
　　
　　，注入色谱仪，重复进样5次。可定量的色谱峰有12个，其中的10个色谱峰重现性好，其相对保存时间及相对峰面积的RSD均小于5%，10个峰占总峰面积的90%以上，说明仪器精细度良好。
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