高效液相色谱法测定橘红痰咳液中柚皮苷的含量.doc

高效液相色谱法测定橘红痰咳液中柚皮苷的含量
李慧 [摘要] 目的 建立测定橘红痰咳液中柚皮苷含量的高效液相色谱(HPLC)法。 方法 色谱柱:Phenomenex-C18( mm×250 mm,5 μm),流动相:甲醇-醋恒重的柚皮苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL含45 μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备
精密量取供试品1 mL,加甲醇稀释并定容至25 mL,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
阴性溶液的制备
按照供试品溶液的制备方法,取缺少化橘红的阴性对照样品,制备成阴性对照溶液。
干扰试验
按照“”项下的色谱条件,吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各10 μL,注入液相色谱仪,记录色谱图。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,有色谱峰出现,而阴性对照液无相应峰出现,表明阴性无干扰。见图1。
线性关系考察
分别吸取柚皮苷对照品溶液( μg/mL)2、4、6、8、10、12、16、20 μL,注入高效液相色谱仪,记录色谱图,测定峰面积。以峰面积(Y)为纵坐标,进样量(X)为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程为:Y=12 162X-27 556,r= 9。~ μg范围内,峰面积值与进样量(μg)之间线性关系良好。
精密度试验
精密吸取柚皮苷对照品溶液( μg/mL)10 μL,按“”项下色谱条件,重复进样6次,测得柚皮苷峰面积积分值分别为5 400 267、5 413 236、5 440 989、5 455 261、5 454 005、5 411 008,平均5 429 128,RSD = %(n=6),表明仪器的精密度良好。
稳定性试验
取同一供试液(批号:100801),分别于制备后0、1、2、3、4、5、6 h进样,测得样品中柚皮苷峰面积值分别为4 886 932、4 846 555、4 855 303、4 830 029、4 831 674、4 815 527、4 801 096,平均4 838 159,RSD=%,表明供试品溶液在制备后6 h内基本稳定。
重现性试验
对同一批样品(批号:100801)分别制备6份供试品溶液,按照“”项下色谱条件测定,、、、、、 mg/mL, mg/mL, RSD=%(n=6),表明方法的重现性良好。
加样回收率试验
取已知含量的样品6份( mg/mL), mg,按“”项下供试品溶液制备方法操作,按公式计算回收率,回收率(%)=[测得量(mg)-制剂中含量(mg)]/加入对照品量(mg)×100%。回收率试验结果见表1。

表1 回收率试验结果









样品含量测定
取三批橘红痰咳液样品,按“”项下供试品溶液制备方法操作,按“