枳实提取物中类黄酮的高效液相色谱法测定及其抗氧化作用研究.doc

枳实提取物中类黄酮的高效液相色谱法测定及其抗氧化作用研究
　　【摘要】目的建立了枳实中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦盯槲皮素含量的测定方法，同时测定了枳实提取物的抗氧化作用。方法采用HPL法，色谱柱：PhenenexGeini18柱(150枯燥，得浅棕色粉末。
　　〔HPL法，芦盯柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、槲皮素为对照〕色谱条件：PhenenexGeini18(150×，5μ)，柱温37℃，流动相A：100%乙腈，B:%磷酸溶液，梯度洗脱：0%～15in，A〔15%～20%〕；15～20in,A(20%～80%);20～23in,A(80%～100%);23～24in,A(100%～15%);24～30in,A(15%)。，检测波长分别是280，365n，进样量10μl。
　　·的去除作用［4］准确称取2,2-二苯代苦味酰基标准品20g，无水乙醇溶解定容至500l，。取此溶液3l，参加不同浓度的试样溶液1l，室温，30in，测定吸光度值A515n，空白组以1l无水乙醇代替试样，并按下式计算去除率：DPPH·去除率〔%〕=〔1-A试样/A空白〕×100%
　　3结果
　　、新橙皮苷、橙皮苷、，，，，∶二甲亚砜〔1∶1〕溶解并定容至50l，得对照品储藏液。并将溶液稀释5倍后，分别以5，，10μl进样；，分别以5，，10μl进样，柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷在280n，芦丁及槲皮素在365n处测定。记录色谱图，见图1～2。以峰面积为纵坐标(Y)，绝对进样量(μg/l)为横坐标(X)作图，见图3，结果见表1。
　　表15种对照品的标准曲线〔略〕
　　图1柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷对照色谱图〔略〕
　　图2芦盯槲皮素对照色谱图〔略〕
　　图3柚皮苷标准曲线〔略〕
　　，以甲醇∶二甲亚砜〔1∶1〕溶解并定容至25l，得样品储藏液。将3份1l的样品储藏液分别与1，，，计算柚皮苷、橙皮苷及新橙皮苷回收率。结果见表2。
　　表2回收率结果〔略〕
　　，样品以甲醇：二甲亚砜〔1∶1〕溶解并定容至50l，得样品储藏液。测得柚皮苷、橙皮苷、%，%，%。%，%，%。
　　，样品以甲醇∶二甲亚砜〔1∶1〕溶解并定容至50l，得样品储藏液。测得柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦丁和槲皮素的平均含量分别为〔±〕%，〔±〕%，〔±〕%，〔±〕%，〔±〕%。见图3～4。
　　图4枳实提取物色谱图(280n)〔略〕
　　图5枳实提取物色谱图(365n)〔略〕
　　·去除作用结果见表3。从表3可见，芦盯槲皮素、柚皮苷、枳实提取物具有DP