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SBAE生物传感分析仪使用说明
SBA-40E型生物传感分析仪
操作说明书
第一章 仪器的工作
固定化酶膜是分析仪工作的关键部件,它是一个多层膜结构,其切面结构如下图所示,酶膜装到电极后,其内膜和固定化酶层与电极表面紧贴在一起。O型橡胶圈使酶膜容易运送、装配,并确保流动反应池的密封
支撑微孔膜
O型橡胶圈
内膜层
固定化酶层
电极表面
图5:固定化酶传感器剖面与安装示意图
第三章 分析仪配套的试剂盒
第一节 酶膜的贮运说明
酶膜圈是分析仪关键传感器的一部份:SBA-40专用酶膜圈的结构见图4。
贮存、运送过程中保持0-8℃,并注意贮存期限。
使用中酶膜活性是缓慢地逐渐下降的,当活性下降到对标准液响应电压为以下,建议更换酶膜,即使酶活不太低,但如酶活不稳定,测定误差大,也需更换酶膜,SBA-40E分析仪在换膜时可自动记录酶膜的安装时间,第一次定标时间和定标酶活性,最后一次定标时间和定标酶活性,第一次校线性时间和线性值,最后一次校线性时间和线性值,可以随时从显示菜单的左电极信息和右电极信息项中查询酶膜安装时间及其活性与线性相关信息。
第二节 酶膜的参数
酶膜的活性:,因为SBA-40E分析仪内建有温度补偿系统,不便直接测定电极的响应电流,酶活性以定标过程中,过氧化氢电极前置放大器的响应电压表示。这个电压不同种类的酶膜有差别,一般均在100mV以上。
酶膜在其使用期内的表观活性变化(由酶活和电极表面状态共同决定)是有一定规律的:刚装上膜后,活性迅速上升,达到一定值后,活性上升越来越慢,直到稳定。这是酶膜活性的前期,约需数小时,这个阶段膜上的固定化酶层充分吸水,由固态变成充分膨胀的凝胶状态,固定化酶层对底物和小分子的通透性趋向于越来越好。这个阶段分析仪也能工作,但是由于酶膜活性有变化,因此需要在测定过程中增加定标校正次数。
酶膜在装机后24小时内可能活性变化较大,以后活性变化趋向缓慢,在短期内很难察觉,这是理想的工作期,一般可持续半月以上,不同酶膜有差别,有的可以持续一个月以上,甚至达到数月。
酶膜的活性与操作、运送、保养条件有关,下列的不当操作可以造成酶膜失活:
运送和贮存温度高于8℃ 。
进样的样品中含有过量的酸或碱,没有进行中和处理。
不用SBA-缓冲液进行分析操作。
由于缓冲液用尽、泵管破裂、或接口漏气等原因造成酶膜长时间失水。
酶膜的线性:理想的酶膜应对被测物质在测定浓度范围内具有良好的线性响应,但实际上,由于酶促反应的非线性,很难保证完全的线性响应,由酶的米氏动力学反应方程可知,在小于标样浓度的范围内,当浓度为标样的1/2时,测定中可能具有最大的误差,当测定对象的浓度低于标样浓度时,可选择标样浓度的1/2来作线性校正,当测定对象的浓度经常高于标样浓度,也可选择2倍标样浓度来校线线。SBA-40E分析仪把校线性点的测定值与标样浓度的比值定义为酶膜的线性。根据米氏动力学方程可知,当标样浓度1/2作校线性点时,膜的线性应略大于50%,而用2倍标样浓度校线性时,则膜的线性略应小于200%。
SBA-40E分析仪可以通过“设置|项目参数|线性校正”菜单开关线性校正功能,并选择仪器的线性校正类型,新酶膜一般不需要作线性校正,酶膜的线性随着酶膜的使用而逐渐变坏,不同种类的酶膜线性情况也不一样,如检查发现酶膜线性不好,可以通过设置菜单,启用线性校正,仪器会在定标通过后提示进行线性校正。酶膜的线性的变化是非常慢的,SBA-40E型分析仪在作线性校正后会自动保存最后一次线性校正参数,除非有更换酶膜或重新设定标样浓度的操作,线性校正参数保持不变,所以对酶膜的线性不需经常校正。每周作1-2次线性校正就足够了。线性校正的间隔时间可以通过“设置|参数|校线性时间”来定义。
【当线性校正或二次定标功能开启后,如定标键设定为手动定标时,则按定标键后菜单自动弹出,提示确定定标类型是正常定标、还是线性校正或二次定标。对于正常定标,可以通过按住定标键2秒以上(此时不弹出菜单),直接定标】
酶膜的工作寿命:即安装后酶膜连续工作期。有酶膜的有效期内,符合标准运送条件和工作条件的合格葡萄糖和谷氨酸酶膜应能连续工作30天以上;乳酸酶膜的连续工作寿命为15-30天。
在4℃的贮存条件下,葡萄糖、谷氨酸酶膜有效期为12个月。乳酸酶膜的9个月。
下表为常用酶膜的质量标准:
表3:常用酶膜的质量标准
酶活性
对于100mg/100ml谷氨酸,葡萄糖,50mg/100ml乳酸的标样,前置输出电压为:标样谷氨酸、乳酸>250mV, 葡萄糖>1
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