实验常用仪器原理和使用.ppt

实验常用仪器原理和使用
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工作计划
3、打开反射白灯灯开关。
调节光圈大小，使画面内能观察到图像。
在计算机显示屏上观察凝胶是否已全部在显示区域内：如凝胶位置不在画面中央，请重新移动物和免疫沉淀物等的分离纯化工作，但不能有效地沉降病毒、小细胞器(如核蛋白体)或单个分子。
超速离心机：大于30×103 r/min，最大离心力600,000g，有驱动和速度控制系统，温度控制系统，真空系统（减少摩擦）。。
它能使过去仅仅在电子显微镜观察到的亚细胞器得到分级分离，还可以分离病毒、核酸、蛋白质和多糖等。
左上：普通台式离心机。 左下：冷冻台式离心机。右：超速离心机。
左图：不同离心机的不同转头
右图：超速离心机的不同转头
离心机使用的注意事项
高速与超速离心机是生化实验教学和生化科研的重要精密设备，因其转速高，产生的离心力大，使用不当或缺乏定期的检修和保养，都可能发生严重事故，因此使用离心机时都必须严格遵守操作规程。
使用环境环境温度：5℃－40℃；22℃时最大相对湿度80%；20℃－25℃是最佳工作环境温度。
1、使用各种离心机时，必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物，平衡时重量之差不得超过各个离心机说明书上所规定的范围。
2、离心前必须仔细检查转头各孔内有无异物。
3、根据待离心液体的性质及体积选用适合的离心管，有的离心管无盖，液体不得装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、生锈或被腐蚀，而制备性超速离心机的离心管，则常常要求必须将液体装满，以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。
4、离心过程中不得随意离开，应随时观察离心机上的仪表是否正常工作，如有异常的声音应立即停机检查，及时排除故障。
5、每个转头各有其最高允许转速和使用累积限时，使用转头时要查阅说明书，不得过速使用。
6、离心时不准开盖，不准用手停止转头。
7、每次使用后，必须仔细检查转头，及时清洗、擦干，转头是离心机中须重点保护的部件，搬动时要小心，不能碰撞，避免造成伤痕，转头长时间不用时，要涂上一层上光腊保护，严禁使用显著变形、损伤或老化的离心管。
常见的消毒与灭菌
热力灭菌法
辐射杀菌法
滤过除菌法
消毒(disinfection)
杀灭物体或环境中的病原微生物。
但不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。
灭菌 (sterilization)
杀灭物体上所有微生物的方法。
包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。
第一节        热力灭菌法
高温对细菌具有明显的致死作用，因此最常用于消毒和灭菌。
分为干热灭菌和湿热灭菌两大类。
（一）干热灭菌法
杀菌作用是通过脱水干燥和大分子变性。
1. 焚烧 用于废弃物品或动物尸体等
2. 烧灼 用于微生物学实验室的接种环、试管口等的灭菌。
3. 干烤
利用干烤箱灭菌（160~170ºC，2h）
适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品
4. 红外线
~1000μm波长的电磁波，尤以1~10μm波长的热效应最强。
热效应只能在照射到的表面产生。多用于医疗器械的灭菌。
（二）湿热灭菌法
最常用，效果优于干热灭菌法。
理 由：
①湿热中细菌菌体蛋白质较易凝固变性
②湿热的穿透力比干热大
③湿热的蒸气有潜热效应存在。

用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物、保持物品中所需不耐热成分不被破坏的消毒方法。
用于消毒牛乳、酒类（~ºC，ºC，15~30s）。
超高温灭菌法
2. 煮沸法
100ºC，5min 杀死细菌繁殖体
100ºC，1~2h 杀灭细菌芽胞
3. 流动蒸气消毒法
利用1个大气压下100ºC的水蒸气进行消毒。
细菌繁殖体15~30min可被杀灭。
4. 间歇蒸气灭菌法
利用反复多次的流动热蒸气间歇加热以达到灭菌的目的。
100ºC，15~30min，37ºC孵箱过夜*3次
适用于一些不耐热的含糖、牛奶等培养基。
5. 高压蒸气灭菌法 灭菌效果最好。
高压蒸气灭菌器是一个密闭、耐高压蒸锅。
（）ºC，15~20min，可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。
常用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的灭菌。
高压蒸气灭菌使用注意事项：
冷空气需彻底排除；
加水；
压力降为“0”时方可打开。
突然降压，招致培养基沸腾，沾湿