液质联用实验报告.docx

高效液相色谱HPLC实验报告
Y30140281 贾宁
一、 实验目的：
1了解液相色谱的发展历史及最新进展
2学习液相色谱的基本构造及原理
3掌握液相色谱的操作方法和分析方法，能够通过HPLC分离测定来对目标 化合物的分析鉴定。高效液相色谱HPLC实验报告
Y30140281 贾宁
一、 实验目的：
1了解液相色谱的发展历史及最新进展
2学习液相色谱的基本构造及原理
3掌握液相色谱的操作方法和分析方法，能够通过HPLC分离测定来对目标 化合物的分析鉴定。
二、 实验原理：
液相色谱法采用液体作为流动相，利用物质在两相中的吸附或分配系数的微 小差异达到分离的目的。当两相做相对移动时，被测物质在两相之间进行反复多 次的质量交换，使溶质间微小的性质差异产生放大的效果，达到分离分析和测定 的目的。液相色谱与气相色谱相比，最大的优点是可以分离不可挥发而具有一定 溶解性的物质或受热后不稳定的物质，这类物质在已知化合物中占有相当大的比 例，这也确定了液相色谱在应用领域中的地位。
高效液相色谱可分析低分子量、低沸点的有机化合物，更多适用于分析中、 高分子量、高沸点及热稳定性差的有机化合物。80%的有机化合物都可以用高效 液相色谱分析，目前以已经广泛应用于生物工程、制药工程、食品工业、环境检 测、石油化工等行业。
1•液固吸附色谱法 使用固体吸附剂，常用的吸附剂为硅胶或氧化铝，粒度 5到10 “m的硅胶吸附剂。被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分 吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附与解吸附的平衡过程。适用于分离 分子量200到1000的相对分子质量中等的油溶性试样的组分，大多数用于非离 子型化合物，离子型化合物易产生拖尾，对具有官能团的化合物和异构体有较高 的选择性。
2•液液分配色谱固定相和流动相均为互不相溶的液体，可利用组分在固定 相和流动相上的分配。对于亲水性固定液，常采用疏水性流动相，即流动相的极 性小于固定相的极性(正相，normal phase)，反之，流动相的极性大于固定相 的极性(反相，reverse phase)。正相与反相的出峰顺序相反。
三、 实验方案及流程：
1、 开机前准备
对流动相进行过滤，然后超声脱气10〜20分钟。把流动相放入溶剂瓶，A瓶 为水相，B瓶为甲醇。
2、 开机
打开计算机，打开1100LC各模块电源。
待各模块自检完成后，双击InstrumentlOnline图标，进入工作站画面。
从视图菜单中选择“方法和运行控制”等选项，来调用所需的界面。
打开冲洗阀。
单机泵图标，出现参数设置菜单，单击“设置泵”选项，进入泵编辑 画面。
设流速：1. 0 ml/min，单击确定。
单机泵图标，出现参数设置菜单，单击“控制”选项，选中“启动”， 单击确定，则系统开始运行，直到管线内无气泡为止。
关闭冲洗阀。
单击泵下面的瓶图标，选择“溶剂瓶填充量”输入溶剂的实际体积和 瓶体积，也可输入停泵的体积，单击确定。
3、 设置保存方法
从方法菜单中选择“编辑完整方法”全部选中，单击确定，进入下一 画面。
在“方法信息”中加入方法的信息，单击确定。
泵参数设置，在流速处输入流量1. 0 ml/min,紫外检测器后分流，进 。在Solve