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722 型分光光度计的使用方法

一、 测量原理

分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照
射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的722 型分光光度计的使用方法

一、 测量原理

分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照
射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不
同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围
的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度 A 与溶液的浓度 c（g/l）或液层厚度 b(cm)
成正比。其定律表达式 A=abc

（a 是比例系数）。当 c 的单位为 mol/l 时，比例系数用 ε 表示，则 A=εbc
称为摩尔吸光系数。其单位为 L·mol-1·cm-1 它是有色物质在一定波长下的特征
常数。

T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K·C·L(比色皿的
厚度)
测定时，入射光 I,
吸光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，
即“K”为常数。比色皿厚度一定，“L”、“I0”也一定。只要测出 A 即可算出“C”。
《分光光度计的表头上，一行是透光率，一行是吸光度。》
二、 722 型分光光度计的使用
1、将灵度敏 旋钮调至 “1”档（信号放大倍率最小）。
2、开启电源，指示灯亮 ，选择开关置于“T”，波长调至到测试用波长。
仪器预热 20 分钟。
3、打开试样室（光门自动关闭），调节透光率零点旋钮，使数字显示
为 。（调节 100%T 旋钮），盖上试样室盖，将比色皿
架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透光率 100%旋钮使数字显
示 。如显示不到 ，则可适当增加微电流放大的倍数。（增加灵度敏
的档数同时应重复（3）调节仪器透光率的“0”位）但尽量使倍率置于低档
使用。这样仪器会有更高的稳定性。
4、预热后，按（3）连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置，待
稳定后仪器可进行测定工作。
三、 吸光度“A”的测量
将选择开关置于 A 。调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为零，然后将
被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
四、 浓