炮制因素对甘草中有效成分甘草苷和甘草酸的影响.doc

炮制因素对甘草中有效成分甘草苷和甘草酸的影响.doc炮制因素对甘草中有效成分甘草苷和甘草酸的影响
【摘要】目的探讨炮制因素对甘草中甘草苷和甘草酸含量的影响。方法筛选适当提取方法,采用HPLC-DAD技术,Zorbax SB-C18 ODS反向色谱柱( mm×250 mm,5 μm),%(体积分数)甲酸溶液和甲醇为流动相,梯度洗脱, ml·min-1,柱温30℃,检测波长250 nm和276 nm。测定了同一产地、同一批次的甘草和炙甘草中甘草苷和甘草酸的含量。结果甘草经蜜炙后甘草苷和甘草酸的含量增加(P<)。结论炮制因素可显著增加甘草中甘草苷和甘草酸的含量。
【关键词】甘草;甘草苷;甘草酸;炮制;高效液相色谱
甘草系豆科植物甘草(Glycyrrhiza uraienxis Fisch)的根及根状茎,俗称灵草、蜜甘、蜜草,能调和诸药,始载于《神农本草经》,被列为上品,是临床上最常用的中药之一。甘草在中医临床应用中有甘草和炙甘草之分,其中甘草指生甘草,为原药材除去杂质,洗净、润透切片、生用入药者。炙甘草又名炙草、蜜炙甘草,为生甘草片用蜂蜜拌匀,再炒至不粘手取出摊晾,然后入药者[1]。
炮制是根据中医药理论,依照辨证施治用药和药物自身性质以及调制、制剂的不同要求所采取的一项制药技术,是中医药学的一大特色[2]。在古代方剂中甘草与炙甘草应用区别明显:甘草性甘偏凉,长于泻火解毒、化痰止咳;而甘草经蜜炙后味转甘温,以补脾和胃、益气复脉力胜。现代药理学研究表明,炙甘草能抗多种心律失常;甘草和炙甘草的调节免疫作用存在明显的差异,蜜炙甘草的调节免疫作用显著强于甘草。炙甘草应为临床补气用甘草的最佳炮制品,可调节机体的免疫功能[3]。由此可见,甘草经炮制后理化性质发生变化,其性味功能也有所改变。我们以甘草中最主要的2种有效成分甘草苷(liquiritin)和甘草酸(glycyrrhizic acid)为检测指标,采用HPLC-DAD法比较甘草炮制前后这2种成分含量的变化,从化学成分角度来探讨中药炮制的合理性、科学性。
1 仪器与试药
仪器 Shimadzu LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津),包括SCL-10Avp System Controller、 SPD-M20A DAD二极管阵列检测器、LC-10 ADvp 泵、FCV-10ALvp四元低压梯度洗脱系统、LC-Solution色谱数据工作站;梅特勒托利多AE240 电子天平(瑞士Mettler Toledo公司);Millipore超纯水机;超声波清洗器(型号SK250LH,上海科导超声仪器有限公司)。甲醇(色谱纯,);水为超纯水;其余试剂皆为分析纯。
试药对照品甘草苷(批号:06121824)及甘草酸(批号:06110101)由上海同田生物科技有限公司提供。甘草(批号:20071229;产地:甘肃)及炙甘草(批号:20071229;产地:甘肃)药材购自徐州医药股份有限公司中药饮片厂,经徐州医学院附属医院杜长俊副主任中药师鉴定为真品。甘草和炙甘草为豆科植物甘草的干燥根及根茎的炮制加工品。样品凭证保存于我科。
2 实验方法与结果
色谱条件色谱柱:Zorbax SB-C18反向色谱柱( mm×250 mm,5 μm),