土壤微生物研究土壤采集方法.doc

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土壤微生物研究规范——

土样从采集点到实验室往往需要经历一定时间的运输,土样运输过程中难免影响土壤的温度、水分、氧气等环境条件,所以要尽快置于黑暗、低温(4℃)的密闭环境,尽1/8
土壤微生物研究规范——

土样从采集点到实验室往往需要经历一定时间的运输,土样运输过程中难免影响土壤的温度、水分、氧气等环境条件,所以要尽快置于黑暗、低温(4℃)的密闭环境,尽量维持土壤含水量稳定不变,黑暗环境是为了避免光照下藻类在土壤表明的生长,低温是为了减少细菌繁殖,维持微生物区系稳定。一般装于聚乙烯袋子,并松扎。另外,储存时尽可能避免物理压实,样品袋不要堆叠过多,以免破坏土壤原有的团粒结构,并导致底层样品处于厌氧环境.
微生物取样的土壤样品需要在0—4℃的条件下保存,所以土壤样品应及时保存在保温箱或冰箱中(设置0—4℃),并最好在一周内完成前期处理。
如果采集地有冰箱、熏蒸所需的真空干燥器和通风橱等设施,建议将微生物土壤样品熏蒸浸提后,以冷冻的浸提液保存在塑料小瓶中,以方便运送.
如果采集地没有通风橱等设施,建议将所取的土壤样品过筛后冷藏在保温箱中,以方便运送。具体的流程如下:
(1)提前准备好保温箱及冷冻好的冰板。冰板需要提前1-2d冷冻,可以再用自封袋装一定量水分放平冷冻为规则的冰块备用。
(2)按照微生物取样规范进行取样,及时过筛去除根系、土壤动物等杂质,放置在0—4℃保鲜冰箱中保存。。用于DNA分析的土壤样品应用冰盒运输,也可用干冰。
(3)运输当天将土壤样品密封好,放入保温箱中,保温箱底部、四周及顶部均放置冰板和用自封袋密封的冰块,保证样品四周均可接触冰板或冰块。注意保证土壤样品和冰块分别密封,以防路途中融化的水分进入土壤样品造成污染。
(4)到达目的地后,迅速将样品放入保鲜冰箱(0-4℃)保存待测。
如果采样地条件允许,可以根据规范上的实验方法,将样品熏蒸、浸提后保存在塑料小方瓶中,—20℃冷冻,然后再按照上述流程放置保温箱中运送到目的地,迅速放置在冷冻冰箱中(—20℃)保存待测。
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如果购买不到保温箱,可以选用运输水果、蔬菜等的白色泡沫箱,密封严实后亦可。由于泡沫箱保温效果可能不及保温箱,路途较远时应多放置冰板及冰块,途中尽量不要打开,放入及取出都要及时,且需要提前确认样品采集地和目的地的冰箱是否留有足够空间存放土壤样品或者浸提液样品。
特别要注意微生物样品的密封,放置融化的水分或者其他污染源污染样品。
2。 土壤微生物样品的处理
采样后土壤样品应尽快处理手工过筛。过筛之前,去除样品中的植物、 mm筛,促进颗粒间的气体交换,以利于保持土壤的好氧状态,也能去除小石头、动物和植物碎片。一些有机物质如粗腐殖质或泥炭不容易通过2mm筛,此时应在潮湿条件下过5 ,应该将其摊开,置于轻微流动的空气中,促其均匀风干。应不停地用手指捏碎并翻动土壤以免表面过度干燥,通常在室温下进行上述操作。如果土壤需要风干,不要过度风干,风干程度达到过筛要求即可。
3、土壤微生物