血糖的定量测定(葡萄糖氧化酶法)
实验目的及要求
掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的原理和方法。
学会取液器及自外可见分光光度计的使用
实验原理
D-葡糖糖GOD D-葡萄糖酸+ H2O2
H2O2+4-AAP+苯酚POD红色醌化物+H2O
实验仪器及试剂
试管移液管 UNICO-2000型分光光度计恒温水浴锅
酶试剂:葡萄糖氧化酶(GOD)过氧化物酶(POD) 4-氨基安替吡啉(4-AAP)
酚试剂:苯酚
标准葡萄糖溶液:100 mg/dL ( mmol/L)
实验步骤
按下表加入各反应物:
加入物(ml)
空白管
标准管
测定管
葡萄糖标准液
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血清样品
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酶试剂
酚试剂
混匀,37℃保温15min,以空白管调零,505nm波长处测定各管吸光度值。
计算血糖含量=A样/A标×标准溶液浓度
[实验注意事项]
1 分离血清要求使用未溶血样品,否则测定结果偏大。
2要求在30 min内分离血清,糖酵解在全血中以7%/h进行。
3 样本在4℃-8℃可稳定24h,样本放置时间过长会使结果偏低。
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