巴西橡胶树HbCDPK1基因的克隆与功能分析.pdf

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日期:如暾ト日期:、保存、:学校有权保留井向所吊交的学位论文,是本人在导师的指导‘卜.,。,:蚧顾徒宦畚牡母从〖偷缱影妫市砺畚谋豢窃膉『借阅。本人授权海南人学可以将本学何论文的全部或部分内容编入有关数据库进彳焖鳎梢圆芍萦坝⑺跤』蛏描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在导师指导‘:国家有关部南人学。文提导·
,广泛存在于各种植物当中,参与各种生物与非生物胁迫应答反应、生长发育、物质代谢、植物激素信号转导。巴西橡胶树魑一种重要的热带经济作物和能源植物,是目前天然橡胶的主要来源。克隆橡胶树钙依赖蛋白激酶基因并对其分子特征以及功能进行分析,研究其在橡胶树中潜在的生物学功能,对于深入了解橡胶树产胶的分子机制,具有重要的理论意义和实践价值。本研究通过克隆橡胶树钙依赖蛋白激酶基因,并对其基因和蛋白结构、表达特征等进行了分析,为进一步研究其生物学功能奠定基础。主要获得研究成果如下:⒏萆秆∫蚁├碳ぬ跫掳臀飨鸾菏鹘喝楹臀创斫喝椴钜毂泶锏消减文库,获得了一个与钙依赖蛋白激酶具有较高同源性的蛄肦际酰影臀飨鸾菏髦惺状慰寺〉搅艘桓霰嗦敫埔览档白激酶的基因,将其命名为登录号:P蛄蟹析显示,该基因全长含有个核苷酸,其中包含一个的完整开放阅读框峁梗嗦胍桓龊个氨基酸残基的多肽。与蓖麻⒚ü⑷瞬⒎腃葱分别高达.%、.%、.%、和.%。⑸镄畔⒀Х治霰砻鳎琀定位于内质网上,,属于不稳定的亲水蛋白。预测其具有转录、转录调控、信号转导和激素、逆境应答的功能。⒗萌旧宀揭技术,从巴西橡胶树叶片基因组中克隆到了’端调控序列锹己牛6云湫蛄薪蟹治鱿允荆闷纬撕械湫偷暮诵钠舳忧蛲猓还含有多个启动子元件以及多种与胁迫诱导和激素相关的顺式调控元件,以上结果暗示钙依赖蛋白激酶赡懿斡肓讼鸾菏鞯男藕抛5脊桃约岸杂激素、逆境胁迫响应的调控作用。⒗冒攵縍际跹芯苛薍的表达特征。实验结果显示,诎臀飨鸾菏髦谐氏殖鲎槌尚捅泶铮币簿哂忻飨缘淖橹匾煨裕其在胶乳中的表达明显高于其他组织,叶片中的表达量次之,树根和树皮中少量,琗
册用口已经转入烟草基因组中。结论:砀且恢諧览档牡鞍准っ福诎臀飨鸾菏髦谐首槌尚捅表达。乙烯利、茉莉酸、和机械伤害都能够诱导诮喝中的表达。⒐菇个原核表达载体ǔば蛄、笔蛄,经原核表达、蛋白纯化、酶活测定、凝胶迁移率分析,结果显示哂屑っ富钚裕⑶褻一末端具有结合的能力。构建了过量表达的植物表达载体籈,通过根癌农杆菌介导的叶盘转化法获得了曜;蜓滩荨>齈和ǜ婊蚣觳猓醪脚卸达以及明显的组织差异性,表达量依次为胶乳、树叶、树皮、树根;、、机械伤害能够诱导诮喝橹械谋泶铩是巴西橡胶树中一种多功能调节酶,其在转录、转录调控、信号转导、物质代谢、激素和环境应激反应等过程中都发挥着作用,需要进一步研究其功能。关键词:巴西橡胶树,钙依赖蛋白激酶,表达特征,功能分析Ⅱ
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