艾滋病样品采集、处理课件.ppt

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HIV检测
HIV抗体检测
ELISA
快速HIV检测
免疫印记法(WesternBlot)
其他方法:免疫荧光法(IFA)、放射免疫沉淀实验
HIV核酸定性检测
HIVRNA定量测定(病毒载量测定)
CD4+和CD8+T淋巴细胞检测
HIV抗原检测(p24)
样品的采集
艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用样品的采集方法如下:
(一)血清样品采集:用一次性注射器(或真空采血管)抽出一定量静脉血,一般为5mL,放入一次性塑料试管,室温下自然放置1-2小时,待血液凝固和血块收缩后再用3000rpm离心15分钟,吸出血清备用。
(三)采样注意事项
1、采集样品应按临床采血技术规范操作(试剂盒说明书有特殊要求除外)。
2、采集标本时应注意安全,直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层乳胶手套。建议采用真空采血管及蝶形针具,以免直接接触血液。
3、进行静脉抽血时,一定要保证足够的光线,而且采血人员应背靠墙壁,后面不能有人员走动。以防抽血时碰撞,造成意外刺伤。
4、不要把用过的锐利器具(针头)传递给别人;
5、对用过的针头不要用手去重新盖上针套;不要用手从一次性注射器上移去针头;不要用手弯曲、折断或处置用过的针头;
6、用过的注射器及针头直接放到可防止锐利器物刺穿的专门容器中,统一进行高温消毒,115℃,30分钟,然后深埋处理;
7、其它废弃物(酒精棉球、手套)要在作高温焚烧处理;
8、不要将锐利废弃物(针头)同其它废弃物(酒精棉球)混在一起;
9、不要将锐利废弃物放在儿童可以接触到的地方;
10、用肥皂和水认真洗手;
11、采样人员要带乳胶手套、穿隔离衣,避免直接接触体液;
12、处理废弃物的人必须戴厚质乳胶手套;
样品的保存
 
用于抗体检测的血清或血浆样品应存放于-20℃以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2-8℃。
用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下,进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80℃。
用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存,样品采集时间超过48h则不可检测。
样品的运送
第二层容器:要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器,可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内,容器的材料要易于消毒处理。
第三层容器:放在一个运输用外层包装内,应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签(数量,收、发件人)。
样品的运送
血清和血浆样品应在28℃条件下由专人运送。用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下1823℃运送。每一包装的体积以不超过50ml为宜。
运送感染性材料必须有记录。
如分离血浆仍有困难,可直接将抗凝血-20℃以下冻存,采用冰壶冷藏运输,避免冻融。