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FujianJournalofTCMJuly2021,52(7)23
·实验研究·
推拿手法对颈型颈椎病兔痛阈值及炎症因子的影响
陈进城1,2,何坚3,张圆芳4,陈乐春1,2,江煜1,2,张幻真1,2,蒋晶晶1,2,林志刚1,2*,陈水金1,2
(,福建福州350003;,福建福州350003;
,福建福州350122;,浙江湖州313000)
摘要:目的观察推拿手法对颈型颈椎病炎性痛痛阈值及血清、背根神经节(DRG)TNF-α、IL-1β、IL-6
炎症因子的影响,探讨可能的镇痛机制。方法40只6月龄新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、触摸组、推
拿手法组,每组各10只。模型组、触摸组、推拿手法组采用无创颈型颈椎病动物模型制备方法造模。触摸组和推拿
手法组在造模成功后分别施以推拿手法及触摸手法,每日1次,每次10min,连续干预18d,空白组、模型组不予
任何推拿手法及触摸手法。分别于造模前、造模完成时和治疗后采用神经电生理仪检测4组家兔痛阈值,并于造模
后第2天和治疗结束第2天用ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度。治疗结束第2天处死家兔后,用
ELISA法检测兔DRG中TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度。结果造模结束后,与空白组比较,模型组、触摸组、推
拿手法组痛阈值均明显降低(P<),血清TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显升高(P<);治疗后,推拿手法组
较模型组和触摸组痛阈值升高(P<)。模型组、推拿手法组、触摸组血清及DRG中TNF-α、IL-1β、IL-6的浓
度较空白组明显提高,推拿手法组较模型组和触摸组低(P<)。结论推拿手法可改善颈型颈椎病炎性痛
疼痛症状,其机制可能与抑制炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平有关。
关键词:颈型颈椎病;炎性痛;推拿手法;炎症因子;背根神经节;痛阈值;兔
中图分类号::A文章编号:1000-338X(2021)07-0023-03
据研究数据统计,颈痛(neckpain,NP)是全球FingerTPS公司);颈椎病兔固定器(苏州市苏杭科
常见的骨骼肌肉疾病,是全球第四大致残障原因,NP技器材有限公司);高速冷冻离心机(美国Beckman
%[1-2]。颈型颈椎病(necktypeofcer-公司);TNF-α、IL-1β、IL-6的ELISA检测试剂盒
vicalspondylosis,NTCS)是NP中最常见疾病之一,(武汉基因美生物科技有限公司);PBS溶液(美国
NTCS的发病率逐年增高,并出现了显著年轻化的趋Hyclone公司);微量移液器(德国Eppendorf公司)。
势,患病率高、持续时间长,并导致一系列心理和社2实验方法
会问题,严重影响患者生活质量,
程度的经济负担,是医学界关注的焦点[3-4]。研究表机分为空白组、模型组、触摸组、推拿手法组,每组
明,NTCS的主要病理性改变是颈部局部肌肉痉挛、各10只。适应性常规饲养1周后,参照文献[6-7],
水肿及炎症浸润等[5]。推拿治疗作为一种外治法,模型组、触摸组、推拿手法组采用低头位兔颈后部
在治疗患者疼痛时显示出其具有简、便、验、廉、副敷冰块或自制冰袋刺激的方法建立兔NTCS模型,
作用少等诸多优点。本研究通过观察造模前、造模具体操作方法如下:将家兔置于固定器当中,兔低
后及治疗后各组NTCS兔炎性痛阈值及血清、背根头屈曲45°,使其后颈部肌肉呈牵拉状态,在后颈部
神经节(dorsalrootganglion,DRG)中TNF-α、IL-1β、位敷上自制的保湿冰袋,并将吹风机出风口对着兔
IL-6炎症因子的影响,从神经电生理及分子生物学颈部吹。每次操作2h,每日2次,连续造模4周。每
的角度,探讨了推拿治疗NTCS的可能机制,为临天操作结束后,将各组家兔放回笼中,常规单笼饲
床上运用推拿治疗NTCS镇痛机制提供实验依据。养,自由饮食。空白组家兔在其他组造模期间同时
1实验材料置于兔子固定盒中,允许其颈部处于自由活动状态,
,雌雄各不做任何其他干预。
半,~,由福建中医药大学动物实模型评估:①造模后,除空白组外,其余各组
验中心提供。合格证号:SYXK(闽)2019-0007。按照兔血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平升高
实验动物饲养标准常规饲养,动物自由进食和饮水,者为造模成功;②模型兔颈后肌硬度改变,出现条
其饲养过程条件均一致。索状结节情况;③组织形态学改变,包括颈后肌肌
(日本细胞形态、肌原纤维排列及炎症细胞出现等情况。
,推拿手法组采用
收稿时间:2020-05-18
基金项目:国家自然科学基金项目(81804213,81603710);福建省自然推拿按揉法:先将兔置于推拿固定床15min,适应环
科学基金项目(2020J01131847,2020J01131811,2020J0113境,施术者拇指带上无线触觉力按摩指套,拇指罗纹
1816);福建省康复技术重点实验室开放课题(KF2019003,
KF2019015,KF20190116,KF2019021,KF2019024)面置于兔大椎穴(第七颈椎棘突下凹陷处),进行按
作者简介:陈进城(1986—),男,医学硕士,主治医师,主要从事脊柱揉,按揉力度最大为10N,频率为120次/min。触摸
病临床及基础研究。组采用手指抚摸法:先将兔置于推拿固定床15min,
通信作者:林志刚(1983—),男,医学博士,副主任医师。
E-mail:******@,拇指带上无线触觉力按摩指套,拇指罗纹
万方数据
24福建中医药第52卷
面对兔大椎穴进行节律性抚摸,,分析。计量资料符合正态分布以(x±s)表示,组间比
频率为120次/min。每日操作1次,每次10min,连较采用单因素方差进行分析,若方差齐采用LSD方
续干预18d。空白组、模型组不做任何干预。法,方差不齐采用Games-Howell方法;不符合正态
,用10mL型号注射分布的数据采用非参数检验方法。
器吸入7~10mL容量的空气,用耳缘静脉空气栓3结果
塞处死兔子,、
触及到条索状、硬结、有摩擦感的部位剪取肌肉组反应灵敏、活动度与饮食可;造模期间,模型组、触
织,大致在下颈段颈3~6棘突旁约1cm处,取肌摸组、推拿手法组大白兔逐渐出现毛色变黯、反应
肉组织约1cm3(避免过度用力钳夹)。稍迟钝、活动度与饮食均减少,体质量增长速度较
;治疗期间,推拿手法组大白兔一般情
,体质量增长速度较模型组加快。
状况,如毛色、饮食、活动等情况变化。
,未触及肌肉里有明显的条索
模和治疗过程中肌肉硬度的变化及有无条索状。或硬结。模型组、触摸组、推拿手法组大白兔造模结
[8]测量痛阈值的方束时颈后肌肉明显,呈条索状肌痉挛;治疗后推拿
法,设电刺频率400Hz,持续时间10s,电流从0mA手法组较模型组颈肌条索明显变少,显著改善。
逐渐加大,、造模后、治疗后痛阈值比
值。于造模前、造模完成后、治疗后均测取2次,每较见表1。
次间隔时间20s,计算平均值记录并比较。表14组大白兔造模前、造模后、
(x±s)mA
和治疗后第2天这两个时间点,兔盒固定兔子后,
组别n造模前造模后治疗后
对所有兔用一次性采血针进行耳缘静脉采血。血液
±±±
置于采血管内,并及时置于4℃环境下离心,然后
±±)±)
吸取上清,做好标记,并置于-80℃冰箱保存备用。
±±)±)
采用酶标仪检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表
±±)±)4)5)
达水平。
:与造模前比较,1)P<;与造模后比较,2)P<;
第2天和治疗后第2天处死兔子,并迅速取出兔子右与空白组比较,3)P<;与模型组比较,4)P<;
与触摸组比较,5)P<。
侧C6、C7、T1的DRG。置于管内,并及时置于4℃环境
下离心,然后取得上清液,做好标记,并置于-80℃-α、IL-1β、IL-6浓度比
冰箱保存备用。测定DRG中炎症因子TNF-α、IL-较见表2。
1β、IL-6表达水平变化,酶标仪检测[9]。-α、IL-1β、IL-6炎症
。
表24组大白兔血清TNF-α、lL-1β、lL-6浓度比较(x±s)pg/mg
组别n时间TNF-αIL-1βIL-6
±±±
空白组10
±±±
±)±)±)
模型组10
±)±)±)
±)±)±)
触摸组10
±)±)±)
±)±)±)
推拿手法组10
±)2)3)±)2)3)±)2)3)
注:与空白组比较,1)P<;与模型组比较,2)P<;与触摸组比较,3)P<。
表34组大白兔DRG中TNF-α、lL-1β、lL-6浓度比较(x±s)pg/mg
组别nTNF-αIL-1βIL-6
±±±
±)±)±)
±)±)±)
±)2)3)±)2)3)±)2)3)
注:与空白组比较,1)P<;与模型组比较,2)P<;与触摸组比较,3)P<。
万方数据
第7期陈进城等:推拿手法对颈型颈椎病兔痛阈值及炎症因子的影响25
4讨论水肿、炎症浸润及粘连,进而提高家兔疼痛阈值,减
有关炎性痛的机制研究一直是疼痛及神经科轻家兔颈部疼痛。
学领域研究的热点之一。炎性痛是临床常见的病理综上所述,推拿手法可以减轻NTCS家兔颈部
性疼痛类型,其主要表现为持续性的痛觉过敏,如疼痛的症状,其作用机制可能与抑制TNF-α、IL-1β、
常见的颈型颈椎病、骨关节炎、类风湿性关节炎、肩IL-6等炎症因子的表达密切有关。
袖损伤[10-11]。现代医学研究认为,NTCS属于颈椎病参考文献
发病的早期表现,多见于青中年人群,也可称局部[1]KIMR,WIESTC,CLARKK,
first-episodeneckpain:Asystematicreview[J].Musculoskelet
型颈椎病。是由于颈椎间盘退行性变的早期,
NTCSSciPract,2018,33:77-83.
颈肌防御性痉挛,其主要临床表现为颈肩部疼痛不[2],diagnosis,andtreatmentofneck
适感及活动受限[12-13]。NTCS颈痛的发生与炎症因pain[J].MayoClinProc,2015,90(2):284-299.
子密切相关,是常见炎性痛病症之一[5,14]。[3]万丽,李颂,夏士新,
床疗效[J].华西医学,2020,35(1):35-40.
推拿具有疏经通络、理气活血化瘀等作用,能有
[4]MAM,ZHANGSM,ZHANGYD,
效缓解疼痛、消除肿胀,促进肌肉骨骼功能的康X-rayinyouthnecktypeofcervicalspondylosiswithupper
复[15-16]。推拿手法已经广泛应用于NTCS的治疗[17-18],crossedsyndrome[J].ZhongguoGuShang,2019,32(3):225-
但其起效作用机制的实验研究还较薄弱,制约了推229.
[5]-146a、miR-155调控NF-κB信号通路探讨芍
拿学科的进一步发展。因此,研究和揭示中医推拿
药甘草汤治疗颈型颈椎病兔炎症损伤的作用机制研究[D].
手法对NTCS的作用机制,发现其镇痛的关键靶点福州:福建中医药大学,2018:11-72.
是较为重要的问题。[6]张欣,李殿宁,李开平,
采用低头架固定建立颈型颈椎病动物模型的立[J].中华中医药学刊,2015,33(4):913-916.

方法不仅操作较为简便,且具有无创伤性的优势,[]史红美,徐银琴,王光义穴位埋线疗法对颈型颈椎病兔线片
及椎间盘组织形态学的影响[J].时珍国医国药,2019,30(11):
没有损伤所观察组织,有利于后期进行干预和探讨2768-2770.
推拿取效机制的研究[6-7]。本实验在造模过程中发[8]程红,-
现模型组、触摸组、推拿手法组大白兔有搔抓后颈17、IL-17R表达的影响[J].重庆医学,2017,46(17):2326-
2329.
部的动作,且越来越频繁,说明大白兔有颈部不适
[9]林志刚,陈水金,陈乐春,
的症状表现,同时结合痛阈值和炎症因子指标也验镇痛作用及对血清、背根神经节及脊髓背角P物质的影响[J].
证了此种造模方法是成功的;干预过程中推拿手法中华中医药学刊,2019,37(4):877-880.
组兔搔抓后颈部的动作频率渐渐降低,说明推拿手[10]RONCHETTIS,MIGLIORATIG,
法治疗能使家兔颈痛逐渐减轻。但仅通过观察家兔inflammatorymediatorswithpainperception[J].BiomedPhar-
macother,2017,96(13):1445-1452.
行为方面的变化,无法依据量化评估治疗效果,故[11]周杰,陈贞羽,龚杰,
本实验通过检测痛阈方法判定兔颈部疼痛程度的镇痛效应及中枢内啡肽的影响[J].中华中医药杂志,2019,
变化情况[8]。本研究在应用仪器检测家兔痛阈变化34(3):939-943.
时,随着电流的缓慢变大,先出现挣扎摆头动作,接[12]殷磊,徐艺菲,
照疗效观察[J].中华中医药杂志,2019,34(7):3341-3344.
着出现嘶叫声,本研究将嘶叫时的电流值作为标准,[13]吴鸿伟,
每次测量均量取2次,以平均值记录为痛阈值。说颈椎病疗效观察[J].福建中医药,2021,52(3):16-18.
明推拿手法能通过抑制血清及DRG中炎症因子的[14]曹舜,
表达提高家兔疼痛阈值,减轻家兔颈部疼痛,效果效及对炎性细胞因子IL-6、TNF-α水平的影响[J].时珍国医
国药,2019,30(1):134-135.
明确。[15]“脊柱整体观”自制颈部锻炼操结合推拿手法治
NTCS是颈椎病发病过程中早期的病理、生理疗颈型颈椎病的临床研究[D].南京:南京中医药大学,2019:
学改变,由于颈椎相关肌肉发生损伤后出现痉挛,21-49.
导致周围软组织产生炎症反应而出现渗血、水肿、炎[16]:疼痛缓解的中
介作用[J].中国疼痛医学杂志,2018,24(12):927-931.
症浸润及粘连等,而TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因[17]仲卫红,李宇涛,林建平,“三步五法”推拿对颈
[19]
子所致生物化学平衡的破坏是发病的主要原因。型颈椎病肌肉功能影响的临床研究[J].中华中医药杂志,
何坚[5]通过检测NTCS兔模型血清中相关炎症因子2019,34(11):5501-5505.
的表达水平,发现造模后NTCS模型兔炎症因子的[18]张琛琳,
的临床研究[J].中医药导报,2019,25(12):112-115.
表达均显著升高,证实NTCS的发生、发展与炎症[19]HAMAMOTOH,MIYAMOTOH,DOITAM,
因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达有着密切的联系。nondegeneratedanddegenerateddiscsinproducinginflammatory
化学刺激是导致疼痛出现的重要因素之一,减弱炎agentswithorwithoutmacrophageinteraction[J].Spine(Phila
性因子表达水平能减轻疼痛[20]。说明推拿手法这种Pa1976),2012,37(3):161-167.
[20]陈进城,林荣,张圆芳,-146a调控NF-κB信号
治疗方法可以抑制NTCS家兔血清及DRG中炎性通路探讨芍药甘草汤治疗颈型颈椎病兔颈后肌炎症损伤的
因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,减轻组织渗血、作用机制[J].康复学报,2020,30(3):206-211.
万方数据