香蕉苹果酸脱氢酶基因克隆及表达分析.pdf

‘彳劢●:人痩篜.
厂
论文作者繇呷诵盒去坞缮多论文作者签名:密砖匆均驴日期:列辍乱ㄈ日期:刀年卵日期:加鞪喈日日期:扣,辍乱兹海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明日期:加年侣廊原创性声明学位论文版权使用授权说明权益。园童途塞握銮丘澄卮;旦:匕生;旦鷌鱼三生筮查。本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在导师指导下完成的论文成果,知识产权归属海南大学。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名:导师签名:本人已经认真阅读“咝Q宦畚娜氖菘夥⒉颊鲁獭保饨ū救说难宦文提交“咝Q宦畚娜氖菘中全文发布,并可按“章程”中规定享受相关厂、
摘要为了研究胂憬豆挡珊笠蚁┥锖铣傻墓叵担谡3墒欤苹果酸脱氢酶琈毡榇嬖谟诙铮参铮妇种生物体中,具有高度的保守性,。根据辅酶特异性,。唤霾斡胫诙嗌砘疃–罚粑饔茫脂肪酸的氧化,返龋以谥肿用确ⅲ参锷ぃǚ鄯⒂捣⒂植物抗逆等方面发挥重要作用。本研究选取实验室已构建的香蕉果实文库中的一个片段,采用技术从香蕉果实文库中克隆到其全长,经序列测定和同源性分析表明,该全长为,包含一个完整的的开放阅读框,编码霭被幔肫还嵬亚饷富蛲葱院芨撸J亟峁褂蚍治龇⑾諱具有岷衔坏悖还峤岷衔坏悖二聚体结合位点。氨基酸序列比对发现,该基因编码的氨基酸与蓖麻,烟草,桃树和回回豆的氨基酸同源性很高,都在%以上。进化树分析表明,因与小麦,玉米的进化距离较近。,蛟诟髌鞴僦芯泶铮渲性诨ㄖ斜泶量最高,其次在根和果实中表达量较高,在茎、叶中表达量较低,推测可能在许多不同的生理过程中都起着一定的作用。在香蕉果实自然成熟过程中,研究了虻谋泶铮富罴捌还之间的关系。结果表明,淖B妓绞芄捣⒂鹘冢孀殴档某墒表达逐渐上升,在采后饔谖榷ā的酶活随着果实的成熟逐渐增强,与其表达水平呈正相关。苹果酸含量在果实发育早期逐渐增加,在成熟阶段又呈下降趋势。随着果实的成熟,可溶性总糖含量也逐渐上升。源乙烯和乙烯抑制剂砉档奶跫拢舛讼憬豆挡珊蟛煌逼的乙烯释放量,并用荧光定量姆椒ㄑ芯苛薓在香蕉果实采后不同成熟阶段的表达情况。结果表明,正常成熟时,虻谋泶镌诓珊达到高峰与乙烯峰相一致;在外源乙烯处理下,虻谋泶镌诓珊达到高峰,此时也是乙烯高峰;用砗螅琈基因的表达明显受到抑制。以上结果说明,乙烯诱导了蛟谙憬豆抵械谋泶铩用外源虯生物合成抑制剂直鸫硐憬豆担峁明,虵对蛟谙憬豆抵械谋泶镉幸种谱饔谩为了研究蚨苑巧镄财鹊挠Υ鹎榭觯韵憬睹缃辛烁珊怠⒌温、伤害、盐、”和乙烯利等多种胁迫处理。结果表明,在干旱和伤害胁迫下,
蛳碌鞅泶铮辉诘臀滦财认拢没蛟。时表达量最高;在盐胁迫下,蛟北泶锪孔罡撸辉凇财认拢琈基因在达量最高;在乙烯利处理下,虺噬系鞅泶铩用尖孢镰刀菌派硇≈秩鞠憬队酌绺浚觳釳基因的表达情况,结果表明,虻谋泶锸蹻挠盏迹诮又北达量最大。关键词:香蕉:苹果酸脱氢酶;克隆;果实成熟;非生物胁迫:表达分析玎
晰籺琣甀甅,甒、析..瓵瑀%.—琤,.,瑀琾,,,琧,,、琭瑀琹瑂,⑽鰐,,,
甌甒;.甌,【⑽鰐,..;..、.瓵
日习℃香蕉概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯谖镏屎湍茏畲恢械难芯俊谥参锓⒂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯研究内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.研究目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯牧稀⑹约劣胍瞧鳌仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.椒ā采后香蕉果实处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.香蕉曲逆境胁迫处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...