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导师签名:芗雠海南大学学位龛文原创性声明和使用授权说明//丫疘了;//籋痩论文储繇杉德卅慈烀论文作者签名:卡≥权益。回童途塞握銮卮迸卮┕缟鷌旦荒郎恫椤日期:加月日日期:Ⅺ年聖日原创性声明学位论文版权使用授权说明日期:加晟丛日期:砂本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在导师指导下完成的论文成果,知识产权归属海保密论文在解密后遵守此规定。导师签名:本人已经认真阅读“咝Q宦畚娜氖菘夥⒉颊鲁獭保饨ū救说难宦文提交“咝Q宦畚娜氖菘狻敝腥姆⒉迹⒖砂础罢鲁獭敝泄娑ㄏ硎芟喙南大学。
一
摘要‘漆酶且恢趾喾友趸福谠熘焦ひ怠⒎闹ひ怠⒒肪潮;ぁ⑸资源利用、有毒环境污染物转化和新能源开发等诸多领域具有重要的应用价值。但是由于天然漆酶生产周期长、产量低,一直无法满足大规模工业生产的需求,克隆新的漆酶基因和高产、高活性重组漆酶的开发日益成为研究的焦点。本研究应用ù涌莶菅挎吒司蜃橹欣┰龌竦谩ǜ腄片段,经的砑治鲋っ饔胍阎P蛄械淖畲蟮耐葱允ィ浠蚪兄组表达证明该基因编码的蛋白具有漆酶活性。说明所获得的基因序列是新的漆酶活性基因序列,将其命名为。研究用巴斯德毕赤酵母表达漆酶重组蛋白。ü缱;法将这两个载体转化于毕赤酵母基因组,获得重组子産。通过平板筛选重组子,用发酵液平板酶活测定的方法筛选出具有高表达的菌株作为工程菌。在生物反应器中高密度发酵工程菌株疞漆酶;高密度发酵工程菌株珹俨,表达疞漆酶。将发酵液过离子交换层析法纯柱,获得纯度为.%的漆酶蛋白。表达的漆酶进行酶学性质研究,得出漆酶蛋白的最适值为,最适温度为,诱导漆酶表达的最佳铜离子浓度为/珹⒌ツ帷⒈郊酸、对羟基苯甲酸对漆酶的表达不起作用。关键词:漆酶;枯草芽孢杆菌;巴斯德毕赤酵母;高密度发酵;酶学性质—..泶産对
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目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.浴漆酶研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯.:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...漆酶活性分析研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.漆酶酶学性质的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..漆酶的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.崦富虻目寺∮⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..漆酶的异源表达研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯....⒔⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.发酵方式⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.本研究目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯本研究技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯牧嫌敕椒ā实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.旰椭柿!.⑹⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..质粒提取试剂⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..核酸电泳溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.................................................................
.核酸和蛋白电泳溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...酶活检测试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.莶菅挎吒司蜃镈的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..;.目的基因与载体的连接⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯感受态的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.阳性克隆及测序比对分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..重组子保存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..
漆酶基因克隆、工程菌构建及生产重组酶研究 来自淘豆网m.daumloan.com转载请标明出处.
