鸡传染性法氏囊病病毒VP1蛋白影响病毒复制及致病性机制的研究.pdf

中国农业科学院业:预防胖学位论文鸡传染性法氏囊病病毒鞍子跋觳《靖制及致病性机制的研究指一导博士研究生:余飞教师:王笑梅‘申请学位类别:农学博士专研究方向:动物病毒分子生物学和免疫学培养单位:哈尔滨兽医研究所中国农业科学院研究生院提交日期密级:论文编号:月: ’’‘

。\.彬棚私切\\\\.弧嘲什旒多、东制仍知吣中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表专业培养单位芯克⒅行哈尔滨兽医研究所职称单位论文题目论文作者余飞预防兽医研究方向指导教师王笑梅姓名硕签名鸡传染性法氏囊病病毒鞍子跋觳《靖粗萍爸虏⌒缘幕蒲芯动物病毒分子生物学和免疫学评人博导口辩李德山教授东北农业大学生物制药学博导团薛飞研究员预防兽医学答硕导口刘思国仇华吉委刘娣员黑龙江省农业科学院崔玉东黑龙江八一农垦大学会议记录厥论文答辩时间地点学术报告厅阅放主席陈化兰刘春国口/
果。尽我所知表或撰写过的书而使用过的明确的说明并学院有权保留印或扫描等复同媒体上发表研究生签本人声明本人完全导师签名
超强毒株的反向遗传系统。以的诙魏蚼腂节段为骨架拯救出超强毒亲主蛋白。诙魏幸桓隹7旁亩量颍嗦隫蛋白,具有览档腞聚合酶活性。反向遗传技术的成功建立很大程度上推进了的基础研究工作。众多学者对于的节段做了相关的研究,发现的蛋白对病毒的毒力、细胞嗜性有重要作用,蚔蛋白也对病毒的复制有一定影响。但是,病毒的毒力是由多个因素共同决定的,杂诓《镜复制和毒力也有影响。目前,关于难芯咳韵喽灾秃螅琕对病毒复制及毒力的影响尚未见比较深入的报道。本研究旨在研究隝粗萍岸玖Φ墓叵担⒀芯科溆跋觳《靖粗坪投玖Φ姆肿踊啤本研究首先测定并分析了七株的诙稳ɑ蜃樾蛄校⒔ɑ蜃樾蛄猩洗ǖ紾中。通过遗传进化分析结合致病性实验,所测定的七株病毒均属于超强毒株。根据诙进化分析,可将诙位治H鋈海狙芯坎舛ǘ局甑腂节段属于第Ⅱ群和第Ⅲ群。通过序列比对,强毒在鞍咨嫌邪烁霰J氐陌被嵛坏悖直鹗、、、、、以及。在诙蔚部分,在强毒中是保守的,在分,是保守的。为进一步研究系谋J匚坏愣杂诓《镜纳镅匦允欠裼杏跋欤狙芯扛軻的三维结构,构建位点突变的私峁褂蛲槐渲辏、和坏阃槐涞闹行活性结构域突变株和私峁褂虻突变株。,研究其在赴系母粗贫ρ匦裕现将强毒腂节段上的位点突变为弱毒的相应位点,可使病毒在赴上的复制能力增强。将强毒的诙紊系位点槐湮H醵镜南嘤ξ坏鉙,也可使病毒在赴系母粗颇芰υ銮俊=徊秸瘸、、ノ坏阃槐涞牟《荆芯科湓贑细胞上的复制动力学特性,发现将强毒的琂的诙紊系位点槐湮H醵镜南嘤ξ坏鉏,也可使病毒在赴系母粗颇芰υ銮俊?杉鸙以及槐淇商岣卟《驹贑细胞的复制能力。为研究影响体外复制的位点是不是会进一步对病毒的毒力造成影响,本研究首先构建了本毒株。首先将节段的质粒在赴献H荆H螅H镜南赴悍锤炊橙次,从尾根部接种芰銼鸡的法氏囊,在接种后欤雀髯椴煌《镜腟鸡均出现死亡,剖检鸡法氏囊出现病变,经测序和电镜分析证实超强毒已成功拯救。将拯救的诙上不同突变的超强毒进行ザ臼笛椋⑾纸慷镜位点由槐湮狪,可使病毒的致病性增强,将强毒的坏阌蒔突变为墒共《镜闹虏⌒栽銮俊哂蠷依赖的酆厦富钚裕芯坎煌坏阃槐溆跋觳《靖粗萍爸虏⌒缘姆肿踊的因
制。构建了基于诙蔚膍低常⒊晒τ糜诩觳釯木酆厦富钚浴Mü酆厦活性检测,发现将强毒的坏鉜突变为弱毒的相应位点墒共《镜木酆厦富钚陨高,而将弱毒的坏鉏突变为强毒的相应位点《镜木酆厦富钚越档汀S纱丝杉位点影响病毒复制及致病性的分子机制之一是由于其影响了病毒的聚合酶活性。关键词:,《菊龋粗疲虏⌒裕酆厦富钚Ⅱ
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鸡传染性法氏囊病病毒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..《颈嗦氲鞍住⋯⋯⋯..Υ拘苑ㄊ夏也〉姆揽亍病毒粒子⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯基因组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.聪蛞糯г贗芯恐械挠τ谩决定抗原变异,致病性及细胞嗜性的分子基础⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯的诙窝芯拷埂问题与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.本研究的目的及意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..诙稳ǔた寺〖靶蛄蟹治觥材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..《荆琒鸡胚及实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...《镜拇砑癲的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第第二章.
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