实验四药物体外抗菌试验
微生物与免疫学实验
琼脂扩散法
连续稀释法
纸片法
今天要用显微镜,请单学号同学去领显微镜,双学号同学不用领
1、 K—B纸片法(学生操作)
纸片法常用于测定试验菌对各种抗生素的敏感性,所以又叫做药物敏感试验,在临床上可作为选择用药的重要依据。
操作步骤
1 培养试验菌:将菌种斜面培养物移种到肉汤培养液中,37℃培养过夜,×108cfu/ml.
2 涂布试验菌:用无菌吸管吸取一滴菌液滴加在MHA平板上,用无菌涂布棒(L棒)将菌液在整个平板上涂布均匀。
3 贴含药的滤纸片:用无菌镊子贴加含药滤纸片。
4 将平板倒置于37 ℃培养24h,观察结果,测定抑菌圈的大小,LS的解释标准来判断试验菌的药敏性。
青
先
链
庆
K-B纸片法示意图
试验菌平板
注意事项
1 以上各不操作要严格的无菌操作,镊子和L棒都要用酒精烧过之后冷却再使用。
2 贴纸片的时候一定要一次把纸片定位好,接触琼脂后就不能再移动含药滤纸片。
3 不同的抗菌药物其抑菌圈直径的敏感/耐药分界点不一样;有的抗菌药物对不同的菌种的分界点也不一致;LS最新公布的分界点数据来读取药敏试验的结果。
2、连续稀释法
连续稀释法:人为配置连续梯度的药物浓度来检测其抗菌能力,从而找出药物的最小抑菌浓度。
最小抑菌浓度(MIC):能抑制测试菌生长的最低药物浓度即为MIC。
最小杀菌浓度(MBC):能杀死测试菌的最低药物浓度即为MBC。
试验测试(1h)
1、革兰氏染色
做好后请用油镜调好后举手示意
2、平板分区画线
做好后做好标记(学号)将平板扔到玻璃缸中
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