C反应蛋白对心肌细胞基质金属蛋白酶10表达调控的实验分析.pdf

硕士学位论文从Φ鞍锥孕募∠赴式鹗舻鞍酌敢泶锏骺的实验研究崔传珏魏英杰研究员魏英杰研究员,孟宪敏研究员,周建业研究员生物化学与分子生物学心力衰竭心室重构的分子机制所院心血管病研究所阜外心血管病医院姓名指导教师:导师小组:学科专业:研究方向:完成日期:年学校代码:学号::
一、闍信号转导通路参与氇诱导的谋泶锏骺亍鑜㈣录目二、/Ⅸ⋯⋯⋯⋯⋯.论文正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.实验材料、仪器及器械准备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一部分从Φ鞍促进心肌细胞谋泶铩实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二部分冲诱导泶锷系鞯南喙匦藕抛5纪贰小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯论文综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英文缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯滤板法测定转录因子活性原理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯在读期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.晶..⋯⋯...⋯⋯⋯.⋯.⋯....⋯....⋯⋯..⋯⋯.⋯.⋯..⋯⋯.⋯⋯.⋯..⋯..⋯..⋯⋯..讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
最高,.,;以中文摘要性变化;提取细胞总錋,应用荧光实时定量际豕鄄煨募∠赴背景:基质金属蛋白酶一,,又称基质分解素琒腔式鹗舻鞍酌讣易宓某稍敝唬粲谛坷胱依赖的蛋白水解酶,其生物学功能主要是参与正常生理和疾病过程的细胞外,的重构。有关猯谛脑嗖⌒氖抑毓中的作用及其信号转导通路目前还不清楚。我们在先前的研究中发现,心力衰竭患者的心肌组织的接胱笫沂嬲拍┢谥本冻收喙毓叵担示赡苡胄氖抑毓构叵得芮小N颐腔狗⑾衷诖笫笮募」K篮笤缙冢心肌谋泶锼郊纯擅飨陨撸墓:笤缙谖Q字⑵凇R虼耍们提出假说,即炎症因子可能促进谋泶铩NA搜橹ふ庖患偎担们观察了一些心梗后发生反应的主要炎症因子对心肌细胞泶锏影响。预实验的结果显示,从Φ鞍猺珻对心肌细胞谋泶锷系髯饔米钗C飨浴6鳦作为重要的炎性细胞因子,可直接参与心梗的整个病理生理过程。在心梗后的早期,可促进参与心室重构的分子的产生,从而促进心梗后由炎症期向增殖期的转化,间接地促进心室重构。由此可见,赡茉谘字⒁鸬男墓:笮氖抑毓构讨衅鹱重要作用。本课题在此基础上重点研究和阐明冲促进心肌细胞表达的信号转导通路及相关的调控机制。方法:,取其心脏,用胰蛋白酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞。对心肌细胞泶锏挠跋欤河肅刺激心肌细胞,收集细胞培养上清,用酪蛋白酶谱法观察心肌细胞培养上清中幕腎ˋ表达变化;提取细胞总蛋白,:应用特异的信号通路抑制剂,用蛋白免疫印迹杂交技术检测牡鞍妆泶锉浠⑹褂锰匾斓男藕欧肿拥牧姿峄固澹玫白免疫印迹杂交技术检测其信号通路的激活情况。B家蜃佣訫一表达变化的作用:提取细胞核蛋白,应用滤板法检测转录因子的岷激活情况,并使用相应转录因子的徊椒治鲎B家蜃佣訫的调节作用。结果:范薱对纳系髯饔谩2煌ǘ菴刺激心肌细胞均与对照组比较,以玶/冲对细胞培养上清中猯幕钚栽黾拥冲作用不同时间,,
可激活猂谽舳读P藕抛5纪返母餍藕欧肿拥牧姿峄剑甊醖禦读P藕抛5纪泛蚃疎信号通路,,。以咖使用Ⅸ信号通路抑制剂可以阻断磷酸化水平的升高,路和/Ⅸ信号通路共同参与调节訫一的表达上调。Ⅲ皆的抑制剂可以降低Ⅸ的磷酸化水平,抑制牡鞍妆泶锖突钚裕从而明确了/胱B家蜃覣和盯涞墓亓!使用軦心肌细胞谋泶锷系鳌F渲校珽/贑诱导心肌细胞达高峰.,;牡鞍姿匠氏质奔湟览敌裕可达到对照组的琻进一步确定了参与心诱导心肌表达的信号转导通路